宫颈癌EGFR和VEGF的表达及相关性研究(2)
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血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是目前发现的最重要的促血管生长因子，有促进血管内皮细胞分化、增生、迁移和浸润的作用[3]，在多种肿瘤中VEGF的表达增高，并且其水平的高低与肿瘤的某些生物学行为有密切关系。本文对构建含有80例宫颈癌和癌旁组织标本的组织芯片进行免疫组化EnVision法检测EGFR、VEGF的表达，以探讨宫颈癌发生发展中EGFR、VEGF表达与宫颈癌临床病理特征的关系和相关性，寻找宫颈癌抗肿瘤治疗的靶点。
1资料与方法
1.1临床资料
随机选择温州市人民医院病理科2003～2009年间80例宫颈癌根治术石蜡包埋组织蜡块。包括鳞癌、腺鳞癌、腺癌，患者年龄 31～72岁。切4 μm切片1张，HE染色后，在蜡块上选取癌组织区域，采用手术组织芯片制备仪，制备成阵列分别为6×4，7×4，7×4，3个组织芯片蜡块。另取癌旁组织20例作为对照，宫颈癌病理分级按WHO分级标准。临床分期按FIGO的标准。
1.2方法
组织芯片上免疫组化采用EnVision二步法，DAB显色。鼠单抗EGFR检测试剂盒购自北京中山生物技术有限公司，鼠抗人VEGF单克隆抗体购自福州迈新生物技术开发公司。石蜡切片脱蜡，梯度酒精水化，4%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶活性，按各检测物试剂盒说明书进行，苏木素复染，中性树胶封固，镜下观察结果，记录并拍照。以已知阳性片为阳性对照，用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗为阴性对照。2人双盲法观察切片，选取至少5个具有代表性高倍视野(细胞数不少于1000个)，对免疫组化结果进行评估。
1.3结果判断
EGFR表达物定位于细胞浆或细胞膜，以膜着色为主，呈棕黄色；VEGF主要定位于细胞浆，呈棕黄色；镜下根据显色强度和阳性细胞百分率 ......
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