促红细胞生成素对慢性马兜铃酸肾病大鼠的肾脏保护作用(2)
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参见附件。
1.2.2 血、尿生化指标检测 邻苯三酚红钼络合法检测24 h尿蛋白定量，全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)。ELISA法检测外周血vWF含量。
1.2.3肾组织形态学检查 肾组织标本用4%多聚甲醛固定4 h，石蜡包埋，切取4 μm石蜡切片，HE和Masson染色，普通光镜观察。Masson染色纤维化区域染色呈兰色，每张切片随机选取10个不含肾小球的视野(400倍)，用显微图象分析仪测定其纤维化区域的积分光密度值(A)，代表肾间质纤维化面积。
1.2.4 vWF免疫组织化学染色 4 μm石蜡切片依次经脱蜡，水化及抗原修复，正常山羊血清封闭非特异染色，滴加一抗兔抗vWF多克隆抗体，工作浓度为1∶500，PBS代替一抗为阴性对照。然后滴加二抗生物素化羊抗兔IgG，工作浓度为1∶150，37℃孵育20 min，DAB显色，苏木素复染；系列酒精脱水、透明、封片，镜下观察。用显微图象分析仪对图像进行定量分析。每张切片随机选取10个高倍视野(400倍)，测定其阳性物质积分光密度(A)值。
1.3 统计学分析
应用SPSS17.0统计学软件分析处理，其中计量资料用均数±标准差(x±s)表示，组间差异比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1血、尿生化检查结果
EPO组和CAAN组24 h尿蛋白定量、尿素氮和血肌酐、外周血vWF含量均较正常对照组明显升高 ......
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