转染前将293T细胞以4×105个/孔接种于24孔板，将荧光素酶报告基因、海肾荧光素酶质粒pRL-TK、miRNA联合转染293T细胞，转染过程按照LipofectamineTM2000脂质体说明书进行。转染后48 h进行双荧光检测，用PLB裂解液裂解细胞，然后加入LAR II，于发光仪检测得到荧光值M1。加入Stop&Glo检测液，启动海肾荧光素酶检测反应，测得荧光值为M2，以M1/M2的值表示报告基因的荧光素酶活性。

    1.3 统计学方法

    采用SPSS 17.0统计学软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，使用F检验进行方差齐性检验，多组资料比较使用单因素方差分析，组间两两比较使用LSD法，两组资料比较使用t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。

    2 结果

    2.1 CCK-8法检测miR-20a-5p对HK-2细胞增殖的影响

    转染后24 h，miR-20a-5p组、对照组、空白组的吸光度值的差异无统计学意义(P>0.05)。转染后48～120 h，三组吸光度值的差异具有统计学意义，miR-20a-5p组的吸光度值均低于另外两组(P<0.05) ......