雷公藤内酯醇对足细胞EMT相关蛋白mRNA表达的影响(2)

http://www.100md.com 2016年11月5日 《中国现代医生》2016年第31期

     1.3.4 扩增反应条件 在94℃ 2 min进行预变性后：(1)NEPH1：94℃30 s、55℃ 30 s、72℃ 30 s，进行35个循环。(2)ILK：95℃ 3 min，进入34个循环，94℃ 30 s、56℃ 30 s、72℃ 60 s，進行34个循环。(3)MMP9： 94℃30 s、56℃ 30 s、72℃ 60 s，进行33个循环。(4)GAPDH：94℃ 30 s、59.8℃ 30 s、72℃ 30 s，进行25个循环。完成循环后，在72℃ 2 min进行终延伸。各PCR产物与DNA Marker(购自上海生物工程公司)在1.7%琼脂糖凝胶(含0.5 μg/mL溴化乙锭)，0.5%TBE液中电泳(100 V，30 min)，用BIO-RAD凝胶成像系统成像，凝胶定量软件Quantity-one分析其光密度值，以GAPDH为内参照基因，比较各目的基因条带与内参照基因条带的光密度比值。

    1.4 统计学分析

    采用SPSS 17.0统计学软件，计量资料以均数±标准差(x±s)进行统计学描述 ......