1.2 样本收集

    病例组与对照组均于空腹时一次性抽取外周静脉血2 mL于EDTA抗凝管中，-80℃保存。血样在24 h内进行处理、标记、登记、冻存。由专人负责将临床资料、一般情况等数据录入。

    1.3 方法

    1.3.1 基因组DNA提取 基因组DNA提取采用常规的酚/氯仿提取法提取基因组DNA，并溶于TE缓冲液中，获得的基因组DNA用NanoDrop测OD值和浓度，-20℃保存备用。

    1.3.2 引物 参照Gene Bank中RUNX2基因序列及相关文献设计合成引物，由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，上游引物：5′-AGCATGGCACCCAATCCTTTA-3′，下游引物：5′-GCAAGGCTGTTTCCGATGAG-3′。

    1.3.3 PCR反应 PCR反应体系25 μL：DNA模板(40 ng/μL)1 μL，引物P1、P2各0.5 μL，10×PCR缓冲液2.5 μL，dNTP(10 mmol/L)0.5 μL，Taq DNA聚合酶(1U/μL)0.5 μL，灭菌三蒸水19.5 μL。扩增程序为：94℃预变性2 min后进行30个循环 ......