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编号:13319594
姜黄素对THP-1源性巨噬泡沫细胞B类1型清道夫受体表达的影响(2)
http://www.100md.com 2019年3月5日 《中国现代医生》 2019年第7期
     1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    采用由中科院上海细胞生物所细胞中心提供的THP-1源性巨噬泡沫細胞;由美国Gibco公司提供的RPMI1640培养基;立陶宛Fermentas公司生产的逆转录试剂盒;北京百泰克生物科技有限公司提供的TRIzol试剂盒。由上海生工生物工程有限公司合成的SR-B1引物序列。新生牛血清购自四季青生物工程材料有限公司。姜黄素(LPS)由美国Sigma公司提供。由广州市锐博生物科技有限公司合成的siRNA。

    1.2 方法

    1.2.1 低密度脂蛋白的分离、氧化修饰及鉴定 采用序列超速离心法制备LDL,采用10 μmol/L CuSO4氧化修饰成氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),采用0.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定修饰程度,过滤除菌,4℃保存备用。

    1.2.2 细胞培养 采用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基培养THP-1细胞,于37℃下5% CO2培养箱中静置培养。每3天传代1次。传代后第1天收集细胞,以4×106个接种于25 cm2培养瓶中 ......
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