1.2 关节软骨细胞培养和处理

    18只雄性SD大鼠(3月龄，200～250 g)随机分成3组，NS(Con)组6只，Dex组6只，Dex+Rif组6只。通过培养SD大鼠股骨头软骨细胞，取股骨头软骨。该程序经徐州医科大学动物实验伦理委员会[SYXK(jiangsu)2016-0028]批准。根据夏韶襁等[6]所用的方法从大鼠的膝关节分离关节软骨细胞进行细胞培养和治疗。将软骨细胞在补充有10%FBS和抗生素DMEM/F12的培养基中培养。在该研究中，原代细胞维持在单层培养中，当细胞达到汇合后，将不同浓度的Dex加入含有或不含利福平的培养基中，每个实验至少重复3次。

    1.3 细胞活力测定

    将ROS水平以5×103细胞/孔的密度接种细胞并使其粘附过夜，第二天加入Dex，范围10-7～10-4 M。通过CCK-8在24 h、48 h和72 h测量活细胞量。根据说明书要求，将PI/Hoechst混合物添加到培养板中用于细胞凋亡检测。使用DCFH-DA探针测定细胞内ROS水平。将细胞置于含有或不含有利福平(0.5 μg/mL)的Dex中暴露72 h。暴露后，向培养物中加入10 μmol/L DCFH-DA ......