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快速监测在食品安全保障中的作用
http://www.100md.com 2011年11月1日 《食品安全导刊》 201111
     对食品经营者来说,清洁和卫生是HACCP等认证体系的重要组成部分,对防范风险的发生至关重要。

    在英国,食品卫生是新的地方当局执法监控系统(LAEMS)3个主要的风险评级守则分数之。LAEMS的目的是实施有效的检查和执法,以维护和改进对食品法的遵守情况。

    ATP生物发光检测技术提供了项简便、快捷的方法来监控清洁、卫生和风险状况。该技术的应用已经有25年以上的历史,也有许多相关文章发表。毫无疑问,ATP生物发光快速卫生监测已被广泛用于验证卫生和清洁程序的有效性。ATP快速卫生检测更广泛的益处包括以下几种:实时预警信息,可及时对风险采取纠正措施:关键点监控数据和趋势分析;清洁卫生的证明;优化清洁程序,可节约25%~50%的清洁剂使用成本:改善产品质量和保质期。

    来自世界各地应用表明,ATP测试是个直接、客观,主要用于检测表面物体上产品残留物的方法。ATP检测的目的不是替代传统的平板法微生物检测,它是产品的残留测试,两者是互补关系。本文目的在于阐明ATP卫生监控应用中存在的些问题。
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    ATP卫生监控

    该方法通过荧光素酶将化合物三磷酸腺苷(ATP)转换成光信号,经仪器测量后给出检测结果——相对光单位(R_U)。荧光素酶反应是非常特异的,它只针对ATP而不是ADP或AMP。ATP检测具有很高的灵敏度(检出限通常是10-15moL ATP),数秒钟就能给出结果:同时具有良好的线性、重复性和再现性。但是,由于ATP测试是种生物检测,因此变异性(即低精度和低准确度)要高于化学试验:此外,样本分布和采集也可以对结果产生影响。比较不同的ATP检测系统时,重要的是要理解出现误差的原因以期获得合理的测试结果预期。ATP是种能量载体,存在于包括我们吃的食物、自身的体液和微生物等所有活的有机体内。食品和体液中ATP含量非常大,通常比微生物体内的ATP含量高数百万倍。这主要是由于细胞大小和代谢功能的不同所致。

    ATP检测测定的是所有ATP,不能区分不同来源的ATP。由于污染物并不是均匀分布在产品的接触面上,因此ATP卫生检测不是种绝对和精确的表面污染测量方法,而是种成熟的卫生状况和潜在风险的敏感指标测试。
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    ATP检测结果与食品生产设备中的微生物数量

    ATP检测结果与食品生产设备中的微生物数量是个平行关系。清洗的主要目的是清除产品接触表面的残留物。有效的清洗4-17,可以清除支持微生物生存和生长的物质环境,还可以清除微生物本身。因此,在ATP卫生监控和微生物计数方法之问存在着直接关联,但这两种方法的关联性不可能达到1 00%。因为这两种生物方法检测的是不同的分析物,而且也都有定的变异性。

    些公布的数据显示两者的相关性有的可以达到80%~90%,而有些只有67%(见表1):这主要是由于有些残留物中不含有活的微生物,因而无法被微生物试验检测到。所以理想的清洁效果检测应该是

    种产品残留检测,可以快速给出结果以便采取及时的纠正措施,这也是GMP和HACCP认证不可或缺的。ATP卫生监控的意义也就在于此。
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    ATP试验

    如果细菌数量足够大(通常大于10000CFU/mL),并且无任何其它来源的ATP,ATP试验就能检测细菌。不同的检测系统在没有其他来源ATP存在条件下,其微生物的检测限值并无实际性差异。

    大多数生产设施不太可能在有机物质尤其是食品缺乏的情况下存在有大量的微生物。同样,产品接触表面的清洁标准在食品行业里通常是<100~800CFU/100cm2,这远远低于ATP的检测限。因此,卫生监控中纯粹以检测微生物数量为目的来进行ATP测试的做法是不可取的。RLU

    ATP的测量单位被称为相对光单位(RlU),与长度或重量单不同,RLU不是种标准测量单位。同样RlU也不能等同于CFu(菌落形成单位)。R_U值的大小取决于不同仪器的构造和试剂/拭子的配方。每家生产商都有自己的荧光素酶配方和仪器设计,所有系统对ATP的检测都呈线性,具有类似的灵敏度和重复性。用户期望不同品牌ATP检测系统的RLu值尽可能地接近,但不同系统的RLU数值范围和输出值会存在差异,ATP生物检测本身和样本分布及采集都可能存在着定的变数。因此,ATP卫生检测不应被视为种精确的测定,ATP卫生监控主要是对清洗效率和风险的种灵敏、直接和客观的测试。
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    当比较不同的系统性能时应该注意

    些事宜。对于常规工业应用来说,因上述因素的存在,仅比对RlU值并无实际意义。比对两个系统时最好的方法是看两者的整体性能,即相同检测条件下”通过”和“不通过”的样本数量。表2显示了常规应用中两个ATP检测系统的对比情况,结果显示两者的总“通过”和”不通过”样本符合率接近100%。

    光检测仪器

    目前主要有两种ATP检测系统。是光电信增管(PMT),它采用的是电子放大光信号的玻璃真空管,需要高电压。光电信增管的缺点是较为昂贵、易碎、具有高本底哚音和随着时问的延长会出现漂移等,常常需要定期维护和校准。虽然PMT系统理论上讲具有较高的灵敏度,但由于设计和操作的复杂性以及高本底噪音等缺点往往限制了PMT系统性能的发挥,使其难以真正具有高灵敏度。另种是采用固态、半导体装置的光电二极管ATP检测系统。其特点是坚固耐用、具有较低的本底哚音、低电压、不随时问漂移等。因此采用光电二极管的ATP检测系统如Hyglena公司的SystemSURE和EnSURE系列等通常都比较轻巧、耐用,使用中基本不需要维护:同时价格也相对便宜。
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    具有高RLU数值范围的ATP检测系统并不一定意味着具有更高的敏感性。RLU数值取决于仪器的设计和构造,根据需要显示不同数值范围的“相对”值。般而言,高数值范围可以更好地区分不同结果之问的细小差异,但这只适用于高精确度的检测结果。而ATP卫生监控显然不属于此类范畴。

    任何分析方法的个关键因素是本底干扰,其直接影响低浓度水平测定的可靠性,限制了检测的灵敏度。ATP生物发光过程中的干扰通常来自仪器本身年口配套试剂配方。SystemSURE Plus和EnSURE因其独特的系统设计和试剂配方,使其具有非常低的本底干扰。表3显示了PMT仪器高本底干扰对系统性能的影响,即本底干扰越大,空白样本差异也越大,仪器的灵敏度也就越低。同样,差异的增加也会导致精确度的降低。

    低本底干扰的仪器因具有较少的变异和更为可靠的低RlU值检测,从而提供更好的灵敏度和更为可靠的趋势分析预警。

    ATP生物发光在快速卫生监测中的应用已超过25年,现已成为食品质量和安全保障过程中不可或缺的部分。通过对产品残留物的检测,ATP卫生监控对清洁效果、卫生状态和风险评估提供了种快速、直接和客观的测定。ATP卫生监控的应用不仅节省了企业成本,也提高了产品质量,提供了微生物检测不能提供的信息。ATP检测不适合对产品接触表面的微生物进行直接计数,因为它不具备所需要的灵敏度。在评不同的ATP检测系统时,具有低本底噪音的仪器往往能表现出更好的性能。, 百拇医药