□ 陈俊伸 王琴琴 徐 涛 舒 哲 南京财经大学食品科学与工程学院

    大豆是我国重要的油料作物，同时也是大部分食用蛋白和工业原料的重要来源。1988 年，Hinchee首次报道成功获得大豆转基因植株。1994年美国最早获准推广转基因大豆[1]。其后，转基因大豆在全球种植、加工等过程中相比于普通大豆表现出了越来越多的优越性，但其在转入外源基因后蛋白亚基含量如何变化、加工适宜性如何，需要深入研究。我国目前获农业部审批可进口的转基因大豆有八种[2]，本文将对获取的六种来自不同种植地区的转基因大豆进行分析，根据其基础参数结合蛋白电泳图谱做对比，以寻求转基因大豆蛋白的变化和转基因大豆的加工适宜性。

    1 材料和方法

    1.1 材料和仪器

    转基因大豆(来源于4个国家的6个品种)、硫酸铜、浓硫酸、丙烯酰胺、甘氨酸、Tris、2-巯基乙醇、蛋白标样Marker(Solarbio公司)、BCA蛋白浓度测定试剂盒(Solarbio公司)、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5×)(Beyotime公司)。

    索氏提取装置、高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)、电子分析天平(德国赛多利斯公司)、SL16R台式冷冻离心机(美国Thermo Fisher公司)、HH-2数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)、冻干机(德国Chriet公司)、垂直电泳装置(美国Bio-rad公司)、Chemi DocTMXRS+.ImageLabTMAnalysisSoftware(美国Bio-rad公司)、酶标仪。

    1.2 实验方法

    1.2.1 水分含量的测定(参照GB 5009.3-2010)

    1.2.2 百粒重的测定(参照国标GB/T GB 5519-2008)

    1.2.3 脂肪含量测定(参照国标GB/T 5009.6-1985)

    1.2.4 蛋白质含量的测定(参照国标GB 5009.5-2016)

    1.2.5 水溶性蛋白质含量的测定(参考国标NY/T 1205-2006)

    1.2.6 SPI的制备[3]

    1.2.7 电泳

    采用不连续SDS- PAGE(十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)方法 ......