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常见真菌毒素的解读及其检测方案(2)
http://www.100md.com 2019年7月1日 《食品安全导刊》 2019年第7期
     3.2 呕吐毒素

    脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),主要由禾谷镰刀菌、黄色镰刀菌和燕麦镰刀菌产生,是单端孢霉烯B族毒素。

    1973年,Vesohder从引起母猪拒食和呕吐的玉米中分离得到该毒素,并根据它能引发动物呕吐的特征将其定名为呕吐毒素(Vomitoxin,VT)。DON是雪腐镰刀菌稀醇的脱氧衍生物,也是一种全球性的谷物污染物。

    DON的主要产生菌是禾谷镰刀菌,其为小麦赤霉病与玉米穗腐病的重要病原菌,大多于低温、潮湿和收割季节,在谷物庄稼中慢慢生长。DON一般在大麦、小麦、玉米、燕麦中含有较高的浓度,而在黑麦、高梁、大米中的浓度较低。DON对粮谷类的污染状况与产毒菌株、温度、湿度、通风、日照等因素有关。其热反应较为稳定,一般的烹调及加热不能破坏其毒性,但它对碱性环境比较敏感,用碳酸钠溶液洗涤粮食可除掉70%左右的DON。

, http://www.100md.com     由于粮食中往往存在多种真菌毒素,因此會出现毒素间的协同作用、相加作用等不同情况。DON与玉米赤霉烯酮存在协同作用,能够引起潜在的繁殖功能障碍。雪腐镰刀菌烯醇和DON存在相加作用,同时摄入这两种毒素的动物会出现较重的临床症状。

    3.3 玉米赤霉烯酮

    玉米赤霉烯酮(ZEN)是由多种镰刀菌(主要由禾谷镰刀产生)在代谢过程中产生的一种非类固醇结构产物。此外,玉米赤霉烯酮在许多高等植物体内存在,并作为植物体内的一种激素来调控植物的生长,例如小麦、大豆、棉花等在开花时玉米赤霉烯酮也达到峰值。

    玉米赤霉烯酮可被胃肠道持续吸收,肝肠循环可使其在胃肠道滞留时间延长,其主要随粪便排出,少量可由乳汁排泄。ZEN在动物体内与葡萄糖醛酸结合后还原为玉米赤霉烯醇,该毒素主要污染物为谷物及其制品,可发生于农作物的生长、收获、贮存和加工等各环节。湿度较高的环境条件下镰刀菌更易生长繁殖,因此雨量充沛、相对湿度较高的地区,玉米赤霉烯酮污染情况较为严重。
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    玉米赤霉烯酮为雌激素类似物,急性毒性较低,主要作用于生殖系统,故具有生殖毒性,可造成生殖激素系统紊乱,严重影响动物机体的繁殖机能。

    3.4 赭曲霉毒素A

    赭曲霉毒素是由曲霉属和青霉属的某些霉菌结合产生的真菌毒素,主要有7种结构类似物,分别是赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B、赭曲霉毒素C、赭曲霉毒素D、甲酯化的赭曲霉毒素A及甲酯化或乙酯化的赭曲霉毒素B。从对谷物的污染率、污染水平及对人畜的毒性考虑,赭曲霉毒素A是其中最重要的且具有卫生学意义的霉菌代谢产物。

    赭曲霉素的污染范围较广,几乎可污染玉米、小麦在内的所有谷物。正常条件下,小麦和玉米受污染的机率较小,约1%~5%,其含量为0.01~5mg/kg;大麦和燕麦被污染的机率较高,约为10%,其含量一般在0.1mg/kg以下。

    4 维德维康真菌毒素检测方案-真菌毒素检测系统
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    北京维德维康生物技术有限公司(以下简称“维德维康”)是一家专注于食品中有害化合物残留快速检测技术、动物疫病快速诊断技术研究及相关产品开发的中关村高新技术企业、国家高新技术企业、国家火炬计划重点高新技术企业和北京市专利示范单位。多年来,维德维康深谙市场规律与用户切身需求,致力于为食品生产、加工、流通领域的企业及政府监管部门提供先进的检测技术、产品及综合解决方案。

    目前,维德维康拥有系统性的真菌毒素检测手段,能够为用户提供完善的真菌毒素解决方案和服务,现有检测产品包括:真菌毒素胶体金定性或半定量检测卡、酶联免疫吸附(Elisa)试剂盒和荧光定量快速检测卡,以及高效液相色普(HPLC)与液相色谱-串联质谱仪器确证平台。上述3种免疫学快速检测方法的优势在于:均可使用70%甲醇水统一提取粮食中常检的4项毒素(呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A),单次提取可同时检测多种真菌毒素,较大程度的减少了前处理的工作量,提高了检测效率。食品安全国家标准GB 2761-2017所规定的上述4项真菌毒素限量标准分别为:呕吐毒素≤1000ppb;玉米赤霉烯酮≤60ppb;黄曲霉毒素B1≤5~20ppb;赭曲霉毒素A≤5ppb。
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    4.1 胶体金检测试纸条

    胶体金检测试纸条具备操作简单、检测时间短、不需要仪器设备进行结果读取的优点;但其只能进行定性或半定量检测,灵敏度相对较低,且结果判定易受主观因素影响。胶体金检测卡适用于大批量样本的初次筛选,后续可使用ELISA或仪器方法进行验证。

    4.2 酶联免疫吸附检测试剂盒

    酶联免疫吸附检测试剂盒的操作相对复杂, 检测结果易受人为操作影响,且检测时间长(>30min),不适用于少量样本的检测(成本高、耗时长)。但该产品灵敏度相对较高,可借助于酶标仪读取并计算得到定量的检测数据,适用于大批量样本的同时检测。

    4.3 真菌毒素荧光定量快速检测系统

    根据粮食安全监测工作的实际需要,按照简单、快速、准确、便携和经济等原则,维德维康荧光定量快速检测系统集中整合了荧光定量快速检测卡、必要的前处理设备、荧光免疫定量分析仪和云端数据监管平台,将粮食真菌毒素的检测统一于相同的前处理操作,并与搭建的云端监管平台结合链接,实现了“样品采集-样本处理-真菌毒素提取-定量检测-数据实时上传”,且该过程可以进行全程监管。

    4.3.1 真菌毒素荧光定量快速检测箱

    真菌毒素荧光定量快速检测箱包含多种日常使用的仪器:荧光免疫定量分析仪FQ-S2、检测卡孵育器、掌上离心机、粉碎机(毛刷)、旋涡振荡仪、天平(千分之一)、20~200μL微量移液器、100~1000μL微量移液器、1~5mL微量移液器、称量勺/称量纸、100mL量筒、计时器、10mL/50mL离心管、1.5mL离心管、1.5mL&10mL&50 mL管架、200μL枪头/盒、1mL枪头/盒、仪器使用说明书。, http://www.100md.com
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