崔玉娟

    (北京市延庆区疾病预防控制中心，北京 102100)

    食品安全直接关系到消费者的身体健康情况，因此，为保证消费者的人身安全，保障消费者的权益，相关检测机构必须加大对食品安全检测工作的重视程度。

    1 基因测序技术相关内容分析

    1.1 第一代基因测序技术

    第一代基因测序技术的技术原理采用的是Sanger 提出的链终止法，在测定待测核酸片段序列过程中，向反应体系中加入一定比例的放射性同位素后，可利用DNA 聚合酶与待测核酸对象相结合，直至掺入一种链终止核苷酸为止，最终得到的是一组长度相差一个碱基的链终止物；在产物支持下，以较高的分辨率进行排序，并经过凝胶处理后，使用X-光胶片放射自显影进行检测，最终可精准定位核酸片位置。其测序步骤主要有以下几个过程。①DNA 碎片化。利用基因测序技术，可完整测定基因组，测定前对样品的DNA 进行碎片化，并得到DNA 片段。若测定单个目的基因序列，则不需要进行DNA 碎片化操作。②PCR 扩增及体外克隆。针对特定目的核酸片段的测序，需要对测序区域进行PCR扩增，针对DNA 碎片化情况而言，需要将碎片化的DNA进行克隆，并将其连接到质粒载体中，进而保证被测序样品的纯度和浓度[1]。③ddNTP 法循环测序。此种方法是将待测试样品中加入4 中dNTP 和ddNTP，进而可获取到不用位置匹配终止的序列。

    第一代基因测序试技术的优势是检测准确性高，可称之为测序行业的“金标准”，具有经济成本优势，但其测序通量较低。第一代基因测序技术实现了对PCR 基因产物的测序，获取到了目的基因序列；实现了对突变、插入及缺失克隆产物的验证；同时 ......