田 莎，王云丹，黄立中，田雪飞，许利纯，伍参荣，彭吉勇

    (1.湖南中医药大学中西医结合学院，湖南 长沙410208；2.长沙市中医院，湖南 长沙410100)

    乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，而骨转移又是乳腺癌常见的并发症，其临床主要表现为进行性骨痛、骨折、功能障碍、脊索及神经根受压、贫血、高钙血症，严重影响患者的生活质量，危及生命[1-2]。黄立中教授运用阳和汤加味治疗骨转移癌疼痛取得较好疗效[3-4]。本实验探讨名方阳和汤对裸鼠移植性乳腺癌骨转移模型的作用，以及对模型鼠血清甲状旁腺激素相关蛋白 (PTHrP)、NF-KB 配体的受体(RANKL)、骨保护素(OPG)含量的影响，揭示阳和汤体内抗癌作用的分子机制，为临床治疗乳腺癌骨转移提供科学的理论依据。现将实验方法及结果报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 BALB/c 6～8 周龄裸小鼠，SPF 级，体质量18～22 g，雌性，购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，动物合格证号：SCXK(湘)2009-2004。

    1.1.2 药物 阳和汤由熟地黄30 g、鹿角胶9 g、肉桂3 g、炮姜炭2 g、白芥子6 g、麻黄2 g、生甘草3 g 组成。购自湖南中医药大学第一附属医院药剂科，将药物制成高剂量水煎液 (1 mL 药液中含1.17 g 生药)、低剂量水煎液(1 mL 药液中含0.39 g生药)，密封备用。唑来磷酸，正大天晴药业，规格4 mg/5 mL，批号0908272。

    1.1.3 瘤株 人乳腺癌细胞株MDA-MB-231，购于中南大学湘雅医学院现代实验中心细胞库。

    1.1.4 试剂PTHrP ELISA kit，批号：E0900100226；RANKL ELISA kit，批号 ：E0900100101；OPG ELISA kit，批号：E0900613；均购自长沙市佳和生物科技有限责任公司(美国INVITROGEN 公司生产)。

    1.1.5 仪器 超净工作台：SW-CJ-1CV，苏净安泰公司；CO2培养箱：SHEL-LAB，美国Hitachi；酶标仪：奥地利TECAN；台式离心机：TDZ5-40，长沙天创仪器公司；恒温水浴箱：GG112-10B，上海医疗器械厂；恒温干燥箱：101B-2，上海亚明公司；自动酶标仪：奥地利TECAN；37 ℃恒温箱：GG112-10B，上海医疗器械厂。

    1.2 方法

    1.2.1 动物分组 将成瘤后的裸鼠移植性乳腺癌骨转移模型随机分为4 组：阳和汤高剂量组、阳和汤低剂量组、唑来磷酸组、模型组 ......