活血、破血药对动脉粥样硬化大鼠PCNA蛋白、VEGFmRNA、VEGFR-2mRNA表达的影响
汀组,莪术,川芎,1材料与方法,2方法,3统计学分析,2结果,1各组主动脉内膜PCNA表达的比较,2各组VEGFmRNA,VEGFR-2mRNA表达的比较,3讨论
谢海波,罗尧岳,莫新民,吴亦之,卢 青,徐豫湘,李 武(1.湖南中医药大学第一附属医院,湖南 长沙410007;2.湖南中医药大学,湖南 长沙410007)
动脉粥样硬化(AS)是心脑血管疾病的主要病理基础之一,是一种常见病、多发病。根据AS 的表现,中医可将其归为“血瘀”、“瘕结”等范畴,常采用活血化瘀药治疗。活血化瘀药有活血止痛、活血调经、活血疗伤、破血消癥之分[1]。总的来说,根据活血化瘀程度不同,可分为活血和破血两类。本研究选用活血药当归、川芎和破血药三棱、莪术,观察两类药对AS 大鼠主动脉内膜增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)VEGFmRNA、血管内皮生长因子受体 (VEGFR)VEGFR-2mRNA 表达的影响,探讨二者的作用差异,为临床处方选药提供实验依据。现将实验方法及结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 雄性Wistar 大鼠,8 周龄,体质量(200±10)g,60 只。由湖南中医药大学实验动物中心提供,合格证号:SCxk 豫2005-001。
1.1.2 药物 当归、川芎和三棱、莪术均购于湖南中医药大学第一附属医院,常规煎煮,制成含生药0.18 g/mL 的药液,5 ℃保存备用。
1.1.3 试剂 胆固醇由中国医药(集团)上海化学试剂公司提供(批号:20080923);胆酸钠由上海蓝季科技发展有限公司提供(批号:080628);维生素D3注射液由苏州第六制药厂生产(批号:070621);丙基硫氧嘧啶由南通精华制药股份有限公司生产 (批号:080701);阿托伐他汀(立普妥)由大连辉瑞制药有限公司分装 (批号:85837034);猪油购自农贸市场。PCNA 免疫组化染色试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供 (编号:BM0104);VEGF 原位杂交试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供 (编号:MK1142);VEGFR-2 原位杂交试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供(编号:MK1145)。
1.1.4 仪器 JY3002 型电子天平:上海精密科学仪器有限公司;HHS-2 电子恒温不锈钢水浴锅:上海南阳仪器有限公司;LEICA DM LB2 型双目显微镜:德国LEICA 公司;Shandon325 型石蜡切片机:英国Shandon 公司;7170A日立全自动生化分析仪:日本日立公司;TDZ4-WS 低速台式离心机:上海华岩仪器设备有限公司;MIAS 医学图像分析系统:北航公司;Haier 医用微波炉:Haier 集团;DNP-9162 型电热恒温培养箱:上海精宏实验设备有限公司;S2-93 自动双重纯水蒸馏器:上海亚荣生化仪器厂 ......
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