罗向艳，罗 萍*，颜家朝，李传课，李 波，陈向东

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学第一附属医院眼科，湖南 长沙 410007)

    视网膜色素上皮细胞光损伤模型的建立与评估

    罗向艳1，罗 萍2*，颜家朝2，李传课2，李 波2，陈向东2

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学第一附属医院眼科，湖南 长沙 410007)

    目的 通过不同光照时间和光照强度，探索建立最佳视网膜色素上皮细胞光损伤模型,为视网膜光损伤细胞造模方法提供理论依据。方法 选取原代大鼠视网膜色素上皮细胞和大鼠视网膜色素上皮细胞系,LED白色冷光灯模拟自然光源，选取(2 500、5 000、7 500、10 000 Lux)作为光照强度，以不同光照时间(6、12 h)对细胞进行照射，建立光损伤模型,镜下观察细胞形态,采用MTT法检测细胞活力。结果 光照处理后，RPE细胞活力受到抑制，随着光照强度及时间增强,细胞活力降低明显,原代细胞 6 h 7 500、10 000 Lux 和 12 h 5 000、7 500、10 000 Lux,细胞系 6 h 10 000 Lux 和 12 h 7 500、10 000 Lux,视网膜色素上皮细胞活力均低于空白组(P<0.01)。结论 RPE细胞活力受光照时间及强度抑制,原代细胞较细胞系对光损伤更敏感。

    视网膜色素上皮细胞;光损伤;光照时长;光照强度；原代细胞；细胞系

    视网膜光损伤主要包括三种：机械损伤、光化学损伤、热损伤,三种损伤方式各不同,光化学损伤是视网膜光损伤主要方式之一[1]。伴随着社会发展,灯光的大量使用、高科技仪器和电子产品盛行,增加了视功能的损伤,长期接触导致眼底病变,临床上常见的眼底视网膜疾病，如年龄相关性黄斑变性等均与光照过度有关[2]。近几十年里,针对视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPE细胞)光损伤进行过大量的实验研究,大部分实验基于长时间低强度和细胞系的研究,甚至根据不同波长进行光损伤研究[3-6]。为全面探索RPE细胞光损伤模型及实验进一步研究,我们通过不同光照时间和光照强度，建立最佳RPE细胞光损伤模型,为视网膜光损伤细胞造模方法提供理论依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料及试剂

    大鼠视网膜色素上皮细胞系 (购自上海赛齐生物工程公司)，原代大鼠视网膜色素上皮细胞(购自上海赛齐生物工程公司)，MTT细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒(购自贝博生物公司) ......