武博文 ，武密山 ，2*，王慧娜 ，郭金栋 ，高维娟 ，2，王 茹 ，韩红伟 ，师旭亮

    (1.河北中医学院，河北 石家庄 050200；2.河北省心脑血管病中医药防治重点实验室，河北 石家庄 050091；3.承德医学院，河北 承德 067000)

    地黄饮子含药血清对大鼠BMSCs与NSCs共培养影响转归的研究

    武博文1，武密山1，2*，王慧娜3，郭金栋1，高维娟1，2，王 茹1，韩红伟1，师旭亮1

    (1.河北中医学院，河北 石家庄 050200；2.河北省心脑血管病中医药防治重点实验室，河北 石家庄 050091；3.承德医学院，河北 承德 067000)

    目的探讨以升麻为药引子的地黄饮子(CRD)含药血清对经过骨髓间充质干细胞(BMSCs)共培养后的大鼠神经干细胞(NSCs)的存活和分化的影响。方法 建立BMSCs与NSCs共培养模型，在共培养体系中加入CRD含药血清，从培养第3天开始分别进行5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性标志物微管相关蛋白2(MAP-2)、少突胶质细胞特异性表达蛋白标志物(MBP)免疫细胞化学双染色。采用流式细胞仪检测NSCs的存活率，利用细胞免疫荧光和Western blot法鉴定NSCs的分化情况，比较NSCs的存活率和分化率，分析CRD含药血清对共培养后NSCs的存活及分化的影响。结果 与生理盐水对照组相比，中、高浓度CRD含药血清在BMSCs与NSCs共培养体系中第7天能显著提高NSCs存活率和NSE、GFAP、MAP-2、MBP活性(P<0.01)。结论 CRD 含药血清在BMSCs与NSCs共培养体系中能促进NSCs有效分化和提高NSCs存活率。

    骨髓间充质干细胞；神经干细胞；药引子；地黄饮子；含药血清；神经样细胞

    脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是损伤脊髓平面以下的感觉及运动功能丧失的中枢神经系统疾病[1]，治疗方法主要通过细胞移植[2]。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)是理想的种子细胞[3]，不仅可向成骨细胞等中胚层细胞定向分化，而且在特定条件下还可向外胚层神经元样细胞、星形胶质样细胞和少突胶质样细胞分化[4]。神经干细胞(neural stem cells，NSCs)有多向分化潜能，能分化为特定的神经细胞[5]。BMSCs与NSCs因其特有的生物学特征成为细胞移植的主要来源[6] ......