正交试验设计是使用正交表来安排试验的方法，具有“均匀分散，齐整可比”的特点，是一种高效率、快速、经济的试验设计方法。在中药复方研究中，应用正交设计有利于分析中药复方配伍的主次关系，发现中药复方最佳配伍，指导临床合理用药[12]。故本实验采用正交设计，探讨优化天马颗粒剂原方中药物的最佳配伍。本实验中所采用的CCK-8法，通过检测水溶性四唑盐被活细胞线粒体内脱氢酶氧化还原后生产的甲臜间接反映活细胞的数量，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。本法具有灵敏度高，重复性较好，毒性低，操作简单，检测时间短的优点，已常规应用于生物活性因子检测、抗肿瘤药物筛选、肿瘤药敏试验、细胞增殖测定及细胞毒性检测等[13-17]。本实验直观分析结果表明天马颗粒剂作用于大肠癌细胞的优化处方配伍为：蜈蚣2 g，全蝎3 g，半边莲15 g，黄柏6 g，三棱10 g，胆南星3 g，海藻10 g，黄芪20 g，山药20 g，大黄6 g。方差分析结果显示，天马颗粒剂原方中17味中药的主次顺序为：蜈蚣>三棱>海藻>黄柏>胆南星>半边莲>全蝎>黄芪>山药>大黄>火麻仁>重楼>莪术>当归>党参>夏枯草>车前子 ......