益气解毒方通过Wnt/β-catenin信号通路对鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响(2)
1 材料1.1 细胞株
人鼻咽癌细胞CNE2(低分化)购于北京北纳创联生物技术研究院细胞库。
1.2 药物
益气解毒方药物组成:黄芪30 g,茯苓15 g,党参15 g,天花粉10 g,黄连10 g,白花蛇舌草10 g,甘草6 g,购自湖南中医药大学第一附属医院中药房。水提物具体制备方法参考本课题组前期研究[7],密封保存于-20 ℃。
注射用顺铂Cisplatin(货号:P4394-25MG, Sigma公司)。
1.3 主要试剂及仪器
RPMI-1640培养基(Hyclone公司);细胞周期检测试剂盒(联科生物公司);兔抗鼠Wnt5a/b单克隆抗体、兔抗鼠β-catenin单克隆抗体、兔抗鼠Cyclin D1单克隆抗体、鼠抗兔 β-actin 单克隆抗体(CST 公司);胎牛血清(Gibco公司);二甲基亚砜(AMRESCO公司);彩虹180广谱蛋白 Marker(Solarbio公司);R Dye 800CW山羊抗兔荧光二抗、R Dye 680CW山羊抗小鼠荧光二抗(LI-COR公司) ......
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