手工制作组织芯片及其在病理实训教学中的应用①
【摘要】目的 实现组织芯片技术在病理实训教学中的应用。方法 取鳞状上皮，腺上皮，平滑肌组织等相应的正常组织，良性肿瘤，不典型增生1-3级和恶性肿瘤等组织，采用组织芯片技术制作组织微阵列蜡块并切片，常规HE染色后做成组织芯片教学切片；随机选择三年制临床专业两个班分实验组和对照组，实训4学时并进行双盲测验，统计优秀率并统计学分析。结果 实验组优秀率明显高于对照组，并具有统计学意义。 结论 与传统的病理实训教学相比，组织芯片技术有带教老师易讲解，学生易理解的不可替代的优势，值得在实践中进行推广。
【关键词】组织芯片 病理学 教学 实训
【中图分类号】R735 【文献标识码】A 【文章编号】1674-0742(2011)10(a)-0000-0
组织芯片技术是将数十个、数百个乃至上千个小组织片，按实验设计的需求整齐地排列在一张载玻片上，制备成的微缩组织切片。它具有高信息量、体积小、高效、快速、低耗、易于标准化等优点。可以弥补传统病理教学很多不足，利用此项技术，我们参照文献[1,2]并加以改良，按照章节分类并手工制作病理学和组织学芯片，应用于病理学实训教学，取得显著效果。本文以肿瘤这一章节为例来探讨组织芯片在病理实训教学中的应用。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 教学组织芯片的制作
1.1.1 组织标本的收集和制作。选取正常鳞状上皮，鳞状上皮乳头状瘤，鳞状上皮不典型增生I-Ⅲ级，高分化鳞状细胞癌；低分化鳞状细胞癌；正常腺体，腺瘤，腺上皮不典型增生Ⅰ-Ⅲ级，高分化腺癌，低分化腺癌；正常平滑肌，平滑肌瘤，平滑肌肉瘤；正常纤维组织，纤维瘤，纤维肉瘤等20个组织块，供体蜡块收集自济源市第一人民医院病理科。所有的标本均经过4%中性甲醛固定24h，常规浸蜡并包埋。
1.1.2 组织芯片的手工制作。用手电钻(钻头外径1.8mm)在2.5cm×2cm的受体蜡块上构建7×6个点阵，间距2mm。所选的石蜡标本，经过显微镜下定位后，用手工改造过的腹穿针(内径1.8mm)把目标组织穿刺取下圆柱状标本，分别种植到对应的点阵中，并根据坐标记录标本所对应的组织。然后在38度恒温箱中烘烤2个小时，使与空白蜡块融合为一体。切片厚度5um，芯片信息完全丢失的病例，使用完整切片。
, 百拇医药
1.1.3 切片制备。将蜡块放入冰箱中冻10min后，拿出快速连续切片，厚度4um，常规HE染色并保存备用。
1.2 教学过程的设计
实验分组。随机选取两个三年制临床班(每个班180人)，分实验组和对照组，实验组采用组织芯片教学法进行实训，对照组采用传统教学方法进行实训，4学时后进行双盲测验，测验内容：1、理论笔试， 2、切片诊断。总分为100分。
1.3 结果判定标准：
成绩大于75分为优秀，统计实验组和对照组的优秀率。
1.4 统计学处理
应用SPSS11.5统计软件进行数据分析，采用χ2检验。以P
2 结果
实验组180人122人优秀，优秀率为67.77%，对照组180人91人优秀，优秀率50.55%，实验组优秀率明显高于对照组，差异具有统计学意义(P
3 讨论
组织微阵列是由美国国家卫生院的科学家Kononen J[3]等在1998年在《自然医学》杂志中首先提出来的，经过几年的发展，目前的组织芯片制作仪做出的芯片组织标本数目在50~800个之间[4]，在很多领域都得到应用，近年来组织芯片被逐步应用到医学形态学教学领域，并体现出一定的优越性[5,6]。
实验中发现一些现象，1、实验组实验室老师给学生发放切片速度快而不容易出错，使学生节省了不少时间。2、组织芯片上所选的组织都是非常典型的病变，便于学生自己寻找病变，因此实验组学生普遍比对照组学生提前10分钟左右完成实训任务并上交布置的作业。3、因为就一张切片可以观察，因此实验组学生不小心打碎切片的现象极少发生，这为学生全心全意的实训提供了一个良好的环境，4、实验组学生实训中提出的疑问明显少于对照组，正是上面这些因素，造成实验组学生对肿瘤章节的学习有更深程度的把握和理解，使得对理论课的学习也起到极大的帮助。这些可能都是实验组优秀率明显高于对照组的原因。
, 百拇医药
因此，在病理实训教学中引入组织芯片技术，将会极大的提高学生的学习效率和学习效果。
参考文献
[1] 陈士超.何春年等，自制组织芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧[J].中国组织化学与细胞化学杂志，2008,17(1):114-115.
[2] 孙廷谊,张云汉等.组织芯片的研制及效果[J].郑州大学学报(医学版)，2007,42(1)：116-117.
[3] Kononen J, Bubendorf L, Kallioniemi A, et al. Tissue microarrays for high-throughput molecular profiling of tumor specimens. Nat Med, 1998,4:844-7.
[4] Moch H, Kononen T, Kallioniemi OP, et al. Tissue microarrays: what will they bring to molecular and anatomic pathology?. Adv Anat Pathol, 2001,8:14-20.
[5] 江 涛,吕少文等.组织学考试用组织芯片制作初探[J].解剖学研究，2005,27(3):202-204.
[6] 王清良,卞修武等.组织芯片在病理学教学中的应用前景[J].医学教育探索，2006,5(3):268-269., 百拇医药(李维山 王艳伟)
【关键词】组织芯片 病理学 教学 实训
【中图分类号】R735 【文献标识码】A 【文章编号】1674-0742(2011)10(a)-0000-0
组织芯片技术是将数十个、数百个乃至上千个小组织片，按实验设计的需求整齐地排列在一张载玻片上，制备成的微缩组织切片。它具有高信息量、体积小、高效、快速、低耗、易于标准化等优点。可以弥补传统病理教学很多不足，利用此项技术，我们参照文献[1,2]并加以改良，按照章节分类并手工制作病理学和组织学芯片，应用于病理学实训教学，取得显著效果。本文以肿瘤这一章节为例来探讨组织芯片在病理实训教学中的应用。
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1 材料和方法
1.1 教学组织芯片的制作
1.1.1 组织标本的收集和制作。选取正常鳞状上皮，鳞状上皮乳头状瘤，鳞状上皮不典型增生I-Ⅲ级，高分化鳞状细胞癌；低分化鳞状细胞癌；正常腺体，腺瘤，腺上皮不典型增生Ⅰ-Ⅲ级，高分化腺癌，低分化腺癌；正常平滑肌，平滑肌瘤，平滑肌肉瘤；正常纤维组织，纤维瘤，纤维肉瘤等20个组织块，供体蜡块收集自济源市第一人民医院病理科。所有的标本均经过4%中性甲醛固定24h，常规浸蜡并包埋。
1.1.2 组织芯片的手工制作。用手电钻(钻头外径1.8mm)在2.5cm×2cm的受体蜡块上构建7×6个点阵，间距2mm。所选的石蜡标本，经过显微镜下定位后，用手工改造过的腹穿针(内径1.8mm)把目标组织穿刺取下圆柱状标本，分别种植到对应的点阵中，并根据坐标记录标本所对应的组织。然后在38度恒温箱中烘烤2个小时，使与空白蜡块融合为一体。切片厚度5um，芯片信息完全丢失的病例，使用完整切片。
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1.1.3 切片制备。将蜡块放入冰箱中冻10min后，拿出快速连续切片，厚度4um，常规HE染色并保存备用。
1.2 教学过程的设计
实验分组。随机选取两个三年制临床班(每个班180人)，分实验组和对照组，实验组采用组织芯片教学法进行实训，对照组采用传统教学方法进行实训，4学时后进行双盲测验，测验内容：1、理论笔试， 2、切片诊断。总分为100分。
1.3 结果判定标准：
成绩大于75分为优秀，统计实验组和对照组的优秀率。
1.4 统计学处理
应用SPSS11.5统计软件进行数据分析，采用χ2检验。以P
2 结果
实验组180人122人优秀，优秀率为67.77%，对照组180人91人优秀，优秀率50.55%，实验组优秀率明显高于对照组，差异具有统计学意义(P
3 讨论
组织微阵列是由美国国家卫生院的科学家Kononen J[3]等在1998年在《自然医学》杂志中首先提出来的，经过几年的发展，目前的组织芯片制作仪做出的芯片组织标本数目在50~800个之间[4]，在很多领域都得到应用，近年来组织芯片被逐步应用到医学形态学教学领域，并体现出一定的优越性[5,6]。
实验中发现一些现象，1、实验组实验室老师给学生发放切片速度快而不容易出错，使学生节省了不少时间。2、组织芯片上所选的组织都是非常典型的病变，便于学生自己寻找病变，因此实验组学生普遍比对照组学生提前10分钟左右完成实训任务并上交布置的作业。3、因为就一张切片可以观察，因此实验组学生不小心打碎切片的现象极少发生，这为学生全心全意的实训提供了一个良好的环境，4、实验组学生实训中提出的疑问明显少于对照组，正是上面这些因素，造成实验组学生对肿瘤章节的学习有更深程度的把握和理解，使得对理论课的学习也起到极大的帮助。这些可能都是实验组优秀率明显高于对照组的原因。
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因此，在病理实训教学中引入组织芯片技术，将会极大的提高学生的学习效率和学习效果。
参考文献
[1] 陈士超.何春年等，自制组织芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧[J].中国组织化学与细胞化学杂志，2008,17(1):114-115.
[2] 孙廷谊,张云汉等.组织芯片的研制及效果[J].郑州大学学报(医学版)，2007,42(1)：116-117.
[3] Kononen J, Bubendorf L, Kallioniemi A, et al. Tissue microarrays for high-throughput molecular profiling of tumor specimens. Nat Med, 1998,4:844-7.
[4] Moch H, Kononen T, Kallioniemi OP, et al. Tissue microarrays: what will they bring to molecular and anatomic pathology?. Adv Anat Pathol, 2001,8:14-20.
[5] 江 涛,吕少文等.组织学考试用组织芯片制作初探[J].解剖学研究，2005,27(3):202-204.
[6] 王清良,卞修武等.组织芯片在病理学教学中的应用前景[J].医学教育探索，2006,5(3):268-269., 百拇医药(李维山 王艳伟)