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编号:12856640
非甾体类抗炎药NS398对胃癌细胞株SCG7901的影响(2)
http://www.100md.com 2016年4月25日 《中外医疗》2016年第12期
     1.4 DNA梯形电泳检测细胞凋亡

    按照每瓶104~105个细胞的标准,取指数生长期的SGC7901单细胞悬液,将其接种在25 cm3的培养瓶中,进行24 h的常规培养,进行实验用培养液,也就是浓度不同的NS398,培养72 h,0.25%的胰蛋白酶消化,并根据需要手机细胞,利用酚以及氯仿抽提法来将其中的DNA提取出来,取10 μL,在1.2%的琼脂糖凝胶下电泳检测,在电压100 V的情况下进行3 h。然后分析溴乙锭染色情况,并在紫外灯环境下根据需要拍摄照片。

    1.5 流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及细胞凋亡PI染色法

    SGC7901和浓度不同的 NS398(浓度分别为0、50、100、150、200 μmol/L)作用24 h后。0.25%胰酶被消化,可以收集并制作105个细胞单细胞悬液,将六孔板中的单细胞悬液收集起来,经过两侧的PBS洗,进行200 uL RNaseA(1 g/L)的加入,在37℃的情况下水浴30 min,然后将100 ug/mL染色液添加进去,进行30 min的避光反应后。上机检测。

    1.6 统计方法

    运用统计学软件SPSS 17.0来处理统计结果 ......
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