MiR200对肾癌细胞纤维化影响的相关性分析(2)
1.3.2 Westermblot法检测靶基因蛋白表达 (1)抗体：该研究抗体由Rabbbit polyclonal ZEB1、Rabbbit polyclonal E-cadherin、Rabbbit polyclonal β-Actin和Horseradish peroxidase-conjugate secondary goat anti-rabbit组成。(2)配置1XTris-甘氨酸电泳缓冲液，由18.8 g甘氨酸，3.03 g Tris，1 g SDS构成，使之蒸馏水溶解，配置成1 000 mL保存；配置转膜缓冲液，由2.9 g甘氨酸，5.8 g Tris，在使用前添加200 mL甲醇，依然配置 1 000 mL，配置10XTBS缓冲液，由24.2 g Tris，80 gNaCl，配置1 000 mL，和1XTBS缓冲液，1XTBS缓冲液由10XTBS缓冲液稀释得到，所有缓冲液均室温保存。(3)采用6孔板进行细胞蛋白样品提取，每孔加入含有蛋白酶抑制剂和PMSF的蛋白裂解液150 uL，在冰上进行，上摇床震荡20 min，刮下细胞，放置在1.5 mLEP中 ......
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