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编号:12954312
不孕症和自然流产患者染色体核型异常分析(2)
http://www.100md.com 2016年8月25日 《中外医疗》2016年第24期
     整群收集在该院就诊并进行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者病例,同时对患者进行孕产史、接触史、家族史等可能引起染色体改变的相关信息详细采集。

    1.2 方法

    1.2.1 G显带 无菌操作抽取肘静脉血2~3 mL ,在超净工作台中种植于10 mL培养基中,放置37℃恒温培养箱培养每日混匀1次,培养70~72 h后加入20 ug/mL秋水仙素100 uL混匀后,再继续培养2.5 h, 1 500 r/min离心10 min吸取掉上清,培养物中加入0.075%KC1溶液10 mL低渗处理30 min,加入2 mL固定液预固定10 min离心去上清,加入10 mL固定液固定3次,42℃烤片1 h,隔日进行显带和染色。核型分析:每例至少计数20个核型,分析5个核型,异常者加大计数到60个核型,嵌合型病例计数到100个核型。

    1.2.2 C显带 新滴玻片42烤片1 h。隔日,60℃的1~5%(过饱和)氢氧化钡液10~15 min,在60℃的2×SSC液中处理90 min时,用自来水冲洗干净,5%Giemsa染液染色10 min。

    1.2.3 N显带 新滴玻片42烤片1 h ......
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