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编号:13421105
芭蕉根促成骨细胞增殖及分化的有效组分筛选研究(2)
http://www.100md.com 2019年6月25日 《中外医疗》 2019年第18期
     1.3 方法

    1.3.1 芭蕉根组分的制备 芭蕉根500 g,分别加10倍、8倍、8倍70%乙醇回流提取3次,每次2 h,过滤,合并滤液,回收乙醇并浓缩至浸膏。浸膏加蒸馏水制成混悬液,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到各个萃取液,剩余的水部分回收溶剂,挥干,干燥分别得A、B、C、D组分。

    1.3.2 细胞增殖检测 取对数生长期的SaOS-2细胞 以1×104个/孔将接种于96孔板中,置37 ℃、5%CO2培养箱中孵育24 h后。空白对照组加不含药培养基,药物组每孔加入浓度为100 mg/L的各组分100 μL,阳性对照组为含30 mg/L维生素D3的培养液。继续培养48 h后,采用噻唑蓝在酶标仪在490 nm波长处检测各组吸光度值。

    1.3.3 ALP含量检测 取对数生长期的SaOS-2细胞 以1×105个/孔将接种于24孔板中,置37 ℃、5%CO2培养箱中孵育24 h后。空白對照组加不含药培养基,药物组每孔加入浓度为100 mg/L的各组分100 μL,阳性对照组为含30 mg/L维生素D3的培养液 ......
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