徐江霞，龚淑琪，万振华，邓连瑞，洪建华(、南昌大学第四附属医院检验科，江西南昌330003；、江西省口腔医院，江西南昌330006)

    新型乙肝定量PCR试剂检测性能验证

    徐江霞1，龚淑琪1，万振华1，邓连瑞1，洪建华2

    (1、南昌大学第四附属医院检验科，江西南昌330003；2、江西省口腔医院，江西南昌330006)

    摘要:目的验证一种新型乙肝定量PCR试剂检测性能。方法参照ISO15189:2012要求，设计一系列实验对新型乙肝定量PCR试剂检测性能评价指标验证。结果①正确度验证：比对实验显示新型试剂与传统试剂(上海科华)相关性较好(y= 1.0259x+0.4857，R2=0.9534)；新型试剂参加2014年卫生部室间质评正确率100%。②精密度验证：新型试剂检测高(106)、低(104)浓度样本的批内及批间CV值均小于10%。③可报告范围验证：新型试剂在102～108范围内具有较好线性(y=-0.951x+ 9.1937，R2=0.99892>0.99)。④定量检测限：新型试剂检测原倍(103)、2倍、4倍稀释血清的CV值均小于15%，定量检测限可达到500IU/ml左右。结论新型试剂各项评价指标与厂家声明一致，符合PCR检测要求，具有较好的检测性能。

    关键词：正确度；精密度；可报告范围；检测限

    中国是乙型肝炎感染大国，约有10%的人群为乙肝病毒携带者，乙肝荧光定量PCR检测是用于乙肝疾病诊断及疗效的重要指标之一[1，2]。目前国内用于乙肝荧光定量PCR检测的试剂绝大部分采用传统的煮沸裂解法提取核酸，其有操作费时、样本需要量大、易形成气溶胶造成实验室污染以及易导致核酸丢失等问题[3]。近年来，一种新型的免核酸提取单管PCR反应开始应用，比如湖南圣湘生物开发的“一步法”乙肝荧光定量PCR检测试剂，即采用一种先进的核酸释放技术取代传统试剂的煮沸裂解法提取核酸，将微量的核酸释放剂与标本在PCR反应管内混合数分钟后直接加入PCR反应液进行扩增反应[4，5]。此新技术已获得国家批准，与传统试剂相比，具有操作简便、快速、节约样本、减少核酸污染及核酸丢失等优点，其应用于临床将大大提高基因扩增实验室检测效率，减少实验室污染。但目前该技术在我省各大医院临床应用尚不多见，其临床应用的检测性能仍有待验证。本研究参照ISO15189：2012[6]中有关“临床检验定量检测方法的确认和性能验证”的要求，拟开展一系列临床评价实验用于验证新型“一步法”乙肝定量PCR试剂的检测性能。根据本实验室的实际情况，本研究设计验证的性能指标将包含：正确度、精密度、可报告范围、检测限 ......