兰炜明，姜唯声，谢曙英，徐银，戴坤教，高晓晖，曾小军(江西省寄生虫病防治研究所，江西南昌330046)

    硫酸铵法提取血吸虫感染兔血清IgG初探

    兰炜明，姜唯声，谢曙英，徐银，戴坤教，高晓晖，曾小军

    (江西省寄生虫病防治研究所，江西南昌330046)

    摘要：目的探索硫酸铵法提取血吸虫感染兔血清IgG用于制备阳性参考品的可行性。方法采用饱和硫酸铵溶液对感染兔血清中IgG进行沉淀分离，IHA试剂测定分离前后、冻干前后的抗体滴度以及冻干IgG复溶后的稳定性。结果滴度为1：320的血吸虫感染兔血清经硫酸铵沉淀法提取IgG，经透析、浓缩至原体积后抗体滴度为1：320，粗提IgG以阴性兔血清和蔗糖为冻干保护剂，冻干前、后滴度均为1：160；冻干IgG复溶0d、3d、6d和8d抗体滴度分别为1：160、1：80、1：40和1：40。结论硫酸铵沉淀法提取、冻干IgG不引起滴度改变，冻干保护剂的加入会使抗体滴度下降，冻干IgG复溶3d后滴度出现下降。因此，硫酸铵沉淀法可用于提取血吸虫感染兔血清IgG。

    关键词：硫酸铵沉淀法；免疫球蛋白；血吸虫；IHA

    血清学检查是血吸虫病防治工作中筛查病人的主要方法之一[1]，江西省血吸虫病疫区现场查病常采用IHA试验进行初筛以确定化疗对象[2，3]，而在IHA试验现场工作中，因操作或试剂的影响常有整块检测板呈现阳性或阴性的结果。为保证IHA试验结果的可靠性，在试验中使用阳性参考品进行质量控制显得非常必要[4，5]。但在IHA试剂盒中，配备的阳性参考品的量均较少，而使用各实验室自己保存的阳性血清在经过反复冻融后，亦易于出现抗体滴度下降及出现浑浊的现象[6]，不能满足实际的使用要求。为避免上述的问题，本文探索一种简便的血吸虫感染兔血清免疫球蛋白(IgG)收集方法，以制备血吸虫病阳性对照血清。

    1 材料与方法

    1.1材料阳性兔血清，阴性兔血清，血吸虫IHA检测试剂(江西环鄱科技发展有限公司，批号：20140419，20130206，20140509)；(NH3)2SO4，NaCl，蔗糖，Na2HPO4，KCl，BaCl2，以上试剂均为AR级(国药集团化学试剂有限公司)，批号分别为20130307，20121022，20121120，20040718，2008101 0，F20100519；KH2PO4，聚乙二醇6000(上海精化科技研究所)，批号分别为060916，20001120；透析袋MD77(Solarbio，进口分装，截留分子量8000～14000Da) ......