乙型肝炎病毒标志物检测方法的选择与应用
胶体金,定量,1材料与方法,2结果,3讨论
梁金明,陈 聪,欧志莲,陈康荣,梁惠明,唐家玉(湛江中心人民医院,广东湛江524037)
乙型肝炎病毒标志物检测方法的选择与应用
梁金明,陈 聪,欧志莲,陈康荣,梁惠明,唐家玉
(湛江中心人民医院,广东湛江524037)
目的探讨乙型肝炎病毒定性与定量方法在临床诊治中的应用价值和合理选择。方法收集920例健康体检者血清,分别用胶体金方法、酶联免疫吸附剂测定方法和时间分辨免疫荧光方法检测乙型肝炎病毒表面抗原,对阳性标本再用中和确认试验进行验证和PCR方法检测HBV-DNA。结果920例标本中胶体金法检出阳性96例,酶联免疫吸附测定方法检出阳性104例,时间分辨免疫荧光法检出阳性112例,时间分辨免疫荧光方法与胶体金方法、酶联免疫吸附测定方法比较有统计学意义(P<0.001、P=0.008);中和确认试验确认112例标本均阳性;实时荧光定量PCR检测112例标本HBV-DNA阳性78例。结论乙型肝炎病毒标志物的日常检测方法应由准确性高的定量方法替代目前常用的定性方法。
乙型肝炎病毒;检测方法;胶体金方法;酶联免疫吸附剂测定方法;时间分辨免疫荧光方法;聚合酶链反应
乙型肝炎病毒(HBV)是最常见的一种感染性病毒,因其传染性及病毒本身的耐受性强,危害比较大,在我国和世界都是一个不可忽视的公共卫生问题,特别在发展中国家,全世界约有4亿感染者[1],在我国也曾有过很多争议。所以不管是住院病人、门诊病人还是体检,都会检测乙型肝炎二对半,而对于这个病毒的检测方法则不胜枚举,最常见的有酶联吸附试验(ELISA)、时间分辨法免疫荧光方法(TR-FIA)、化学发光法(CLIA)、胶体金法(colloidal gold)、分析金标免疫层析法(GICA)等,还有与其相关的HBV-DNA、前S1抗原、基因分型等。
乙型肝炎病毒检测方法有定性与定量二类,定性方法中最常用的是ELISA方法,而快速检测方法或即时检验(POCT)也是定性方法,常用的是胶体金方法或分析金标免疫层析检测技术;定量方法最常用的是时间分辨免疫荧光方法和化学发光方法等。
本研究随机从体检人群中选标本920例,分别用快速的胶体金方法、目前最常用的ELISA定性方法和定量的时间分析免疫荧光方法,检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg),对阳性标本进行中和确认试验进行确认及用聚合酶链反应(PCR)检测HBV-DNA,对结果进行分析和比较。
1 材料与方法
1.1 标本收集与处理每周随机选择一天在健康体检者92例 ......
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