张国威，胡国文，牛鑫，汪泱，邓志锋

    (1、泰山医学院，山东泰安271000；2、上海交通大学附属第六人民医院神经外科，上海200233；3、南昌大学第二附属医院神经外科，江西南昌330006；4、上海交通大学附属第六人民医院四肢显微外科研究所，上海200233)

    人胚胎干细胞源性间充质干细胞来源的外泌体生物学特性的研究

    张国威1，2，胡国文3，牛鑫4，汪泱4，邓志锋2

    (1、泰山医学院，山东泰安271000；2、上海交通大学附属第六人民医院神经外科，上海200233；3、南昌大学第二附属医院神经外科，江西南昌330006；4、上海交通大学附属第六人民医院四肢显微外科研究所，上海200233)

    目的探讨人胚胎干细胞源性间充质干细胞(human embryonic stem cell derived mesenchymal stem cells，hESCMSCs)来源的外泌体的生物学特性。方法将已注册的未分化、人类ESC H9细胞系诱导成间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)，通过旋转超滤法从培养基中提取外泌体(exosomes)。流式细胞分析技术鉴定hESC-MSCs表面标志物，对间充质干细胞进行三系分化诱导，利用透射电镜、Izon qNano纳米粒子分析系统观察外泌体的形态和大小，Western blotting鉴定外泌体表面特异性标志物，观察hESC-MSCs-Exo对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells，HMEC-1)增殖和迁移的影响。结果成功诱导形成hESC-MSCs，并收集纯化外泌体。诱导后的MSCs CD29、CD73、CD90、CD105、CD146、CD44表达阳性，CD34、CD133、CD45、HLA-DR-PE表达阴性；hESC-MSCs通过诱导完成成骨、成脂和成软骨分化；hESCMSCs-Exo为粒径在40~100nm的囊泡，表达特异性的表面标志物CD9、CD63和CD81；体外促进HMEC-1的增殖和迁移。结论hESC-MSCs-Exo作为一种生物活性囊泡，能够促进血管内皮细胞的增殖和迁移；hESC-MSCs-Exo来源无限，可为临床组织损伤的修复治疗提供丰富的干细胞外泌体来源。

    人胚胎干细胞源性间充质干细胞；外泌体；生物学特性

    近年来，大量文献报道证实移植成体组织来源的间充质干细胞能够减轻缺血后的组织损伤并促进损伤组织的功能恢复[1-3]。然而，间充质干细胞在体外增殖能力有限 ......