庄养林，熊丽红，张鹏飞，王芳，陈丹，施桥发

    (1、南昌大学医学院，江西南昌330006；2、江西省血液中心，江西南昌330077；3、江西省职业病防治研究院，江西南昌330006)

    标本因素及保存条件对HCV RNA检测的影响

    庄养林1，2，熊丽红2，张鹏飞2，王芳2，陈丹3，施桥发1

    (1、南昌大学医学院，江西南昌330006；2、江西省血液中心，江西南昌330077；3、江西省职业病防治研究院，江西南昌330006)

    目的探讨溶血、脂肪血、保存温度和保存时间对HCV RNA检测的影响，确认用于核酸检测的标本正确采集、处理及保存的关键控制点。方法应用实时荧光PCR法，采用混样检测+单检的检测模式，对在不同浓度的血红蛋白或甘油三脂下以及在不同温度条件下保存不同时间后的HCV RNA标本进行检测，对检测的Ct值进行分析。结果小于7.93mmol/L的不同浓度甘油三脂对HCV RNA检测没有影响(P>0.05)，血红蛋白浓度为97g/L、34g/L、17g/L以及8g/L时，其对HCV RNA检测均有影响(P<0.05)，当血红蛋白浓度小于5g/L时，其对HCV RNA检测均无影响(P>0.05)；保存温度在-30℃下4周内，其检测Ct值差异均无统计学意义(P>0.05)。在低于37℃条件下，4h内保存的HCV RNA标本检测Ct值差异均无统计学意义(P>0.05)。在4℃的条件下保存72h内，HCV RNA标本检测Ct值差异无统计学意义(P>0.05)，25℃的条件下能保存48h(P>0.05)。结论甘油三脂浓度小于7.93mmol/L对HCV RNA的检测没有影响，血红蛋白浓度大于8g/L时会影响HCV RNA的检测，用于HCV RNA检测的标本在4℃保存时最好在72h内完成检测。

    核酸检测技术；Ct值；溶血；脂肪血；保存条件

    核酸检测(nucleic acidtest，NAT)技术因其灵敏度高，其缩短病毒检测的“窗口期”远大于血清学方法，我国采供血机构已将血液部分或全部进行核酸检测。然而在核酸检测工作中，标本的质量，如标本的溶血、脂肪血等因素及运输、保存条件如何会直接关系到检测结果的准确性。国外较早的研究表明，血红蛋白可通过其卟啉环与Taq酶的不可逆结合而抑制Taq酶活性，从而影响PCR测定[1]。此外，检测标本中的核酸降解同样也是影响核酸检测的重要因素。细胞破碎时，RNA酶释放出来则会降解RNA，影响检测的灵敏度。国外有报道，受标本保存方式的影响，可使病毒核酸检测结果的阳性率偏低 ......