吴光锋，范瑞

    (南阳市第一人民医院，河南 南阳 473000)

    食管癌是消化系统常见的恶性肿瘤,中晚期患者5 年生存率低于10%[1]。依据组织形态学的不同，可将食管癌分为食管腺癌和食管鳞状细胞癌，其中食管鳞状细胞癌约占食管癌的90%[2]。肿瘤周围浸润的免疫细胞和其分泌的大量炎性因子可促进肿瘤的发生和发展,抑制机体对肿瘤细胞的免疫识别[3,4]。研究显示，多种炎症介质参与食管癌的发展进程[5,6]。IL-32 是一种促炎细胞因子，包含IL-32α、IL-32β、IL-32γ 等 6 种亚型, 其中 IL-32α 是最主要的亚型[7]。IL-32 的不同亚型在肿瘤、自身免疫疾病、炎症性肠病等疾病中发挥不同作用，参与细胞增殖、凋亡及炎症反应等过程[8,9]。一定剂量范围的IL-32α 可能通过抑制Jak2/ STAT3 信号通路抑制胰腺癌Panc-1 和AsPC-1 细胞的侵袭和转移[10]。IL-32α 通过促进 TNFR1 的信号传导来抑制结肠癌的发展[11]。但目前，IL-32α 对食管癌细胞生物学行为的影响和机制还未知。

    微小 RNA (microRNA，miRNA) 是长度约为18～25 个核苷酸的小分子非编码单链RNA,参与调控细胞生物学行为,在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用[12]。研究显示，miR-216b-5p 过表达可抑制胰腺癌细胞增殖，诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡，并抑制体内肿瘤发生[13]；miR-216b-5p 表达的上调可抑制宫颈癌细胞的增殖，并促进其凋亡[14]。但目前，miR-216b-5p 对食管癌细胞生物学行为的影响还未知。生物信息学软件预测显示，AKR1B10 可能是miR-216b-5p 的靶基因。AKR1B10 是细胞质内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖的可溶性单体氧化还原酶，属醛酮还原酶超家族成员。研究显示，AKR1B10 参与口腔鳞状细胞癌[15]、肺腺癌[16]等肿瘤的发生发展，可作为肿瘤治疗的潜在分子靶点。因此，本研究以食管癌KYSE450 细胞为研究对象，主要探讨了 IL-32α 对 KYSE450 细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并以miR-216b-5p/AKR1B10 轴为切入点，探究了 IL-32α 影响 KYSE450 细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞和试剂 食管癌细胞株KYSE450 细胞，上海吉凯基因化学技术有限公司；胎牛血清，杭州四季青公司；RPMI 1640 培养基，美国Gibco 公司；鼠抗人醛酮还原酶家族1B10(AKR1B10)单克隆抗体 ......