徐红日 王成祥 沈杏生 刘清泉 姜良铎 王惠芳

    现代医学防治流行性感冒(简称流感)的主要手段为疫苗和抗病毒药物，但流感病毒抗原变异频繁且抗病毒药物出现耐药性，因此流感的防治非常棘手[1]。中医药是中国防治流感的重要手段，历年来中医药在防治流感的工作中积累了丰富的经验。以往中医药防治流感的实验研究多重视中药的直接抗病毒作用。近年来中药调节流感病毒感染机体免疫功能方面的研究逐渐增多。而有关中药抗流感病毒感染所致机体免疫损伤及修复其病理损伤方面的报道较少。近年来的研究证实[2]，流感病毒引起的靶器官的损伤，主要是由免疫细胞分泌的炎症介质所介导的一种炎症病理损伤。因此，本实验通过动态观察清热解毒中药对FM1株感染所致小鼠肺部炎症损伤的影响，探讨其治疗流感的药效学机制。

    1 材料与方法

    1.1 药物

    清热解毒中药(由生石膏30 g、黄芩10 g、生甘草3 g共3味药组成，为北京中医药大学东直门医院治疗流感的效方益气清瘟解毒合剂中所含的清热解毒药物)为江苏天江药业有限公司提供的配方免煎颗粒剂，用去离子水配成混悬液。

    1.2 实验病毒株

    采用流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1株)，由中国疾病预防控制中心(CDC)病毒研究所流感室提供，用鸡胚传代至血凝滴度为1∶1280，-70℃冻存。

    1.3 实验动物

    采用BALB/cAnN小鼠，清洁级，雄性，体重18～23 g，共96只，购自中国医学科学院动物研究所，合格证号SCXK(京)2004-0001。

    1.4 仪器设备

    光学显微镜(OLYMPUS IX71，奥林巴斯光学有限公司)、透射电镜(JEM-1230，日本电子株式会社)等。

    1.5 实验操作方法

    将小鼠随机分为3组，分别为空白对照组、病毒感染模型组和中药治疗组，各组按病毒感染后第1、3、5、7天不同时相各分为4个小组，每小组8只小鼠。用乙醚轻度麻醉小鼠后，空白对照组以生理盐水滴鼻，每只滴25 μl。其余两组以25 μl FM1株病毒液滴鼻，感染量为1 LD50。

    用FM1株感染小鼠0.5小时后灌胃。中药治疗组灌服清热解毒中药混悬液，相当于成人临床剂量，即5.58 g·kg-1·d-1。每次给药前均称实验小鼠的体重，根据小鼠体重确定给药量。空白对照组与病毒感染模型组灌等量生理盐水，每日灌胃1次。

    小鼠感染流感病毒FM1株后第1、3、5、7天，摘眼球放血处死动物 ......