张丰川 蔡玲玲 李元文 赵雅静 周志强 赵凤珠

    马拉色菌(Malassezia)是一种存在于人类及温血动物正常皮肤上的常见嗜脂性真菌，属于担子菌亚门-层菌纲-银耳卧线黑粉菌科-马拉色菌属[1]。马拉色菌感染的发病率日益增加，但目前抗菌西药存在疗效欠佳、不良反应多、耐药等缺点。从中草药中寻找广谱、高效、低毒的抗真菌新药已成为药物研究的热点，研究主要集中在治疗马拉色菌相关皮肤病及中药单体抑制马拉色菌方面。因此本文选取了目前抑菌疗效公认的苦参作为研究对象，通过苦参不同制剂以及苦参的主要成分苦参碱、氧化苦参碱与西药酮康唑粉进行体外抑菌实验，比较抑菌作用的优劣，寻找抑菌最佳的剂型或成分并探讨中药抑菌作用和机理。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    苦参粉：取北京中医药大学东方医院中药房苦参饮片100 g在医院制剂室采用小型中药粉碎机(广州康诺，型号：SF-130)研磨成细粉过120目筛,过3遍。

    苦参颗粒剂：由北京康仁堂生产。1 g相当于饮片10 g,共取10 g。(批号:国药，按照饮片管理)

    苦参碱、氧化苦参碱：由湖北午时药业股份有限公司生产。(国药准字H20059335)

    酮康唑粉：由西安杨森制药有限公司生产，含量99.9%，溶于2.5%二甲基亚砜(MDSO)溶液，控制MDSO终浓度低于1%。

    实验菌种:实验用合轴马拉色菌菌株(临床菌株：01780 CBS7222，标准菌株：01899 M.Sympodidalis)，为北京医科大学医院真菌实验室李若瑜教授惠赠。

    主要仪器:麦氏比浊管、高压灭菌锅(SANYOMLS-3020)、水浴箱(北京市医疗设备厂)、恒温培育箱(XMT-152C，重庆四达实验仪器厂)、超净台(造鑫企业有限公司)、显微镜(OLYMPUS-BX60F5)、血球计数板(上海市求精生化实剂仪器有限公司，批号02270113)、一次性玻璃实管(直径10 mm×75 mm，爱思进塑料台州有限公司，批号071110)、电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)、双层铁皮电炉(上海武定电器厂，CL-A型220伏1200瓦)、8×12孔圆底酶标板(中国北京化工厂)。

    1.2 方法

    通过改良美国国家临床实验室标准化委员会制订的M27-A方案中酵母菌微量稀释法，对合轴马拉色菌标准株进行体外抑菌实验，在同一条件下找到苦参粉组、苦参免煎颗粒组、苦参碱组、氧化苦参碱组、酮康唑组五组对合轴马拉色菌的体外抑菌的最佳浓度。

    参考其他类似实验设计用马拉色菌液体培养基对药物进行稀释 ......