地黄饮子加减方对MCAO 模型大鼠血清HPA轴及其脑组织细胞凋亡表达的干预效应研究
灌胃,脑缺血,1材料与方法,1动物及分组,2MCAO模型制备,3药物制备及灌胃方法,4主要试剂,5指标检测,6统计学处理,2结果,1地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血清HPA轴
唐璐 孙塑伦 高颖 朱陵群地黄饮子原方出自刘完素《宣明论方》:“治喑痱,肾虚弱厥逆,语声不出,足软不用”,作为滋肾阴、补肾阳、化痰开窍的代表方剂,它被广泛运用于脑血管病、痴呆、神经系统变性病等的临床治疗。本实验通过观察地黄饮子加减方对大脑中动脉线栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠血清HPA 轴激素水平及其脑细胞凋亡表达的干预效应,探讨了缺血性中风急性期应用温阳补肾法对促进神经功能恢复,改善预后转归的作用机理。
1 材料与方法
1.1 动物及分组
成年SD 雄性大鼠30 只(北京维通利华实验动物技术有限公司SPF/VAF 级,合格证号:SCXK(京)2006-0009)。体重(280±10)g。动物称重编号,用随机数字表法[1]分为正常组、模型组、地黄饮子组,每组10 只。
1.2 MCAO 模型制备
模型组与地黄饮子组大鼠以大脑中动脉线栓法造模。以10%水合氯醛(0.35 mg·kg-1)将大鼠麻醉后仰卧固定,常规备皮,沿颈部正中线切开皮肤1.5 cm 左右,钝性分离颈部肌群,以开睑器充分暴露手术野,分离左侧颈总动脉(common carotid artery,CCA)及 颈 外 动 脉(external carotid artery,ECA),结扎ECA 及CCA 近心端,CCA 远心端穿线备用。动脉夹夹闭ECA 分叉处。于CCA 剪开一个小口,插入头端直径为0.28 mm 的栓线。轻轻结扎固定栓线于CCA 内,开放动脉夹,将栓线插入颈内动脉(internal carotid artery,ICA),使其头端到达大脑中动脉起始处。扎紧固定线,缝合皮肤。术中用100 W 灯泡照射,严格控制室温。缝合伤口,清理血迹,将术后大鼠置于电热毯保持体温,直至苏醒。
1.3 药物制备及灌胃方法
地黄饮子加减方配伍及剂量:熟附片4 g、巴戟天10 g、山萸肉10 g、熟地12 g、石斛10 g、肉苁蓉12 g、五味子6 g、麦冬15 g。按人与动物体型系数折算,等效比例为7 ......
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