郝钰 唐莹 王顺梅 杜贯潮 代红雨

    十全大补汤调整肉桂剂量对氧化损伤大鼠真皮成纤维细胞增殖的影响

    郝钰 唐莹 王顺梅 杜贯潮 代红雨

    目的 从细胞分裂周期变化角度探讨十全大补汤调整肉桂剂量促进创面修复及皮肤修复的机理。方法 采用体外培养成纤维细胞，造成氧化损伤成纤维细胞模型。以血清药理学方法获取大鼠血清，用以对成纤维细胞模型的干预。并运用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MMT法)及流式细胞仪检测成纤维细胞增殖及分裂周期的变化。结果 MMT法结果显示2倍肉桂组和4倍肉桂组对氧化损伤的大鼠真皮成纤维细胞具有促进增殖的作用，与模型组比较差异显著(P<0.01)；流式细胞术结果显示经500μmol/L的H2O2刺激30分钟的大鼠真皮成纤维细胞中G0/G1期细胞比例显著增高，S期和G2/M期细胞比例显著降低。在药物干预24小时后，四个用药组均可降低G0/G1期细胞比例，S期和G2/M期细胞比例升高；在药物干预48小时后，除了去肉桂组以外，其余三个用药组均能使G0/G1期细胞比例降低，S期和G2/M期细胞比例升高，与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.05)，而去肉桂组对细胞周期的影响与模型组相比无明显差异。结论 十全大补汤对氧化损伤的大鼠真皮成纤维细胞具有调控成纤维细胞周期、促进增殖的作用，而适当增加肉桂剂量可以起到增效的作用。

    氧化应激； 创面修复； 纤维细胞细胞； 十全大补汤； 肉桂

    成纤维细胞是创面主要的修复细胞，其生物学行为决定了创面修复的转归[1]。当前研究表明慢性创面存在着氧化应激反应的失衡，过度的氧化损伤延迟了创面的愈合[2-3]。本实验在成功建立大鼠真皮成纤维细胞氧化应激模型的基础上，观察十全大补汤调整肉桂剂量对氧化损伤大鼠真皮成纤维细胞增殖的影响，从抗氧化损伤角度探讨中医药促进创面愈合的机制。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物

    SPF/VAF级Wistar大鼠54只，雄性，体重280～300 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。用随机数字表法将大鼠分为6组，即正常对照组(无氧化损伤模型)、模型组、去肉桂组、原方组、2倍肉桂组和4倍肉桂组，每组8只大鼠。另6只大鼠用于原代培养真皮成纤维细胞。

    1.2 中药复方组成及配方颗粒的制备

    十全大补汤的药物原方组成为：当归9 g、白术4.5 g、茯苓9 g、甘草3 g、熟地黄9 g、白芍4.5 g、人参3 g、川芎3 g、黄芪9 g、肉桂1.5 g(《医学发明》)。去肉桂组药物组成为：原方去肉桂；原方组药物组成为：十全大补汤原方；2倍肉桂组药物组成为：肉桂剂量为原方肉桂剂量的2倍；4倍肉桂组药物组成为：肉桂剂量为原方肉桂剂量的4倍 ......