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编号:1420464
通心络对早期糖尿病肾病大鼠血管内皮生长因子表达的影响
http://www.100md.com 2015年4月21日 环球中医药 2015年第1期
缬沙坦,血浆,1材料与方法,2方法,3统计学处理,2结果,1各组大鼠和KW,BW的水平,2酶联免疫法检测血浆中VEGF的表达,3westernblot及RT-PCR检测肾组织中VEGF,Flt1的表达,3讨
     李娇阳 高彦彬 周盛楠 邹大威 朱智耀 张娜 崔方强 刘静

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最常见的慢性微血管并发症之一,也是糖尿病患者的主要死亡原因之一。在中国近1.14 亿的糖尿病患病人群中,2 型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)约占90.0%,其并发肾病的患病率为34.7%[1-2]。DN 早期的病理特征表现为肾小球的高滤过、高灌注、高内压,肾小球肥大,继而导致系膜区增宽和基底膜增厚,最终发生肾小球硬化[3]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与DN 的发生发展密切相关,VEGF 的异常表达可能是早期肾脏滤过率升高和尿蛋白排泄增加的重要机制[4]。本研究旨在通过观察通心络对早期DN 大鼠VEGF 表达的影响,探讨通心络对肾脏的保护作用及其部分作用机制,为通心络的临床应用提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 SPF 雄性SD 大鼠40 只,体重180g ~220g,8 周龄,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,动物生产许可证号:SCXK(京)2012-0001。

    1.1.2 高脂饲料 配方为10.0%猪油、20.0%蔗糖、2.5%胆固醇、0.5%胆酸盐和67.0%基础饲料,购自北京科澳协力饲料有限公司,许可证编号:SCXK(京)2009-0012。

    1.1.3 药品和试剂 通心络超微粉(人参、水蛭、全蝎、赤芍、蝉蜕、土鳖虫、蜈蚣、檀香、降香、乳香、酸枣仁和冰片等)(批号20121215,河北以岭药业);缬沙坦胶囊(批号X1371,北京诺华制药有限公司),链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(F1030-F0.5,美国Sigma),大鼠VEGF 酶联免疫吸附法测定试剂盒(CSB-E04757r,武汉华美),VEGF 抗体(ab46154,美国Abcam),Flt1 抗体(ab32152,美国Abcam)。

    1.1.4 实验仪器 CareSens POP 血糖仪(爱科来国际商贸有限公司),BioTek EXL800 酶标仪(美国伯腾仪器有限公司),卓越320、330 全自动生化分析仪(上海科华实验系统有限公司),ELITE200 电泳仪(美国Wealtec),V-GES 小型垂直电泳槽(美国Wealtec),PRISM7700 荧光定量 PCR仪(美国ABI),WD-9413 凝胶成像分析仪(北京市六一仪器厂) ......

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