刘钧天 崔莹雪 黄玉海 黄畅 黄剑 赵百孝 韩丽 杨佳 王磊

    艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除小鼠学习记忆功能与海马β淀粉样蛋白沉淀的影响

    刘钧天 崔莹雪 黄玉海 黄畅 黄剑 赵百孝 韩丽 杨佳 王磊

    目的 观察艾烟与香烟对载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E-deficient，ApoE-/-)小鼠学习记忆能力与海马β淀粉样蛋白(β-Amyloid)沉淀的影响。方法 将13只8周龄C57BL/6小鼠作为空白对照组，27只同龄ApoE-/-小鼠随机分为ApoE-/-模型组、艾烟组、香烟组。香烟与艾烟组小鼠分别暴露于5～15 mg/m3的香烟与艾烟环境。各组小鼠每天干预20分钟，每周6天，共干预12周。于第13周进行行为学测试，之后处死动物、取材，对其脑组织海马中Aβ沉淀进行刚果红染色。结果 与模型组对比，空白对照组、艾烟组、香烟组小鼠均表现出学习潜伏期缩短，记忆潜伏期增长，记忆错误次数减少，差别有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组

    选用清洁级8周龄雄性载脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-)27只，C57BL/6小鼠13只，体质量30 g，2013年3月22日购自北京大学动物医学中心[许可证：SCXK(京)2011-0012]。ApoE-/-小鼠采用高脂饲料喂养，C57BL/6小鼠采用标准饲料喂养，自由进水；饲养环境温度(22±2)℃，相对湿度50%～60%，保持12小时光照(8∶00～20∶00)和黑暗(20∶00～次日8∶00)交替循环。

    小鼠购进后，适应性饲养1周，干预12周。按随机数字表法将ApoE-/-小鼠随机分为ApoE-/-模型组、艾烟组、香烟组三组(每组9只)，并将13只C57BL/6小鼠作为空白对照组进行对照。

    1.2 主要实验材料、仪器及试剂

    自制细艾条：(直径0.5 cm×长20 cm，河南南阳汉医艾绒有限公司)；香烟(中南海牌，焦油含量10 mg/支)；自制带孔玻璃缸1 m×1 m×1 m,顶层玻璃正中设一直径5 mm圆孔)； 光散射式数字粉尘测试仪(北京宾达绿创科技有限公司)；小鼠跳台试验仪；刚果红染液(南京建成生物工程研究所)；中性树胶封片剂；多聚甲醛，中性树胶及其它生物试剂(Sigma公司)。

    1.3 实验步骤

    空白暴露：将空白对照组与ApoE-/-模型组小鼠分别暴露于玻璃缸中20分钟。

    艾烟干预：将调试好的粉尘测试仪置于玻璃缸中间，将艾烟组小鼠自由暴露在玻璃缸中，点燃自制细艾条 ......