康楠 王凤云 陈婷 王晓鸽 朱恩林 唐旭东

    脾的主要生理功能为运化水谷、运化水液，输布精微，脾虚证则表现为脾的运化、升清功能失职，致使水谷、水液不运，水湿潴留，化源不足，进而出现腹胀腹痛、食少纳呆、便溏腹泻、浮肿等一系列的症状。泄泻是脾虚证的主症，是因脾虚失运，清浊不分，水湿下注而成。脾虚证的现代研究多从胃肠道动力[1]、胃肠激素水平[2]、黏膜免疫[3]、能量代谢[4]等方面进行探讨，为阐明脾虚证的科学内涵提供了诸多依据。而从水液代谢的角度探讨脾虚泄泻的发生机制的研究还相对较少，本研究拟从这一角度出发，选择胃肠道典型的水通道蛋白为研究对象，观察健脾经典方剂参苓白术散对脾虚泄泻模型大鼠结肠黏膜AQP4、AQP8 的表达情况的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    3 周龄清洁剂级健康雄性Wistar 大鼠42 只，北京斯贝福实验动物科技有限公司，许可证号:SCXK(京)2011-0004。

    1.2 主要药品与试剂

    参苓白术散加减方浸膏干粉(每克干粉含生药量5.64g)，由中国中医科学院西苑医院药剂科提供;蒙脱石散，博福-益普生(天津)制药有限公司，3 g* 10袋，产品批号:F17193。AQP4 一抗(SⅠGMA，A5971)，AQP8 一抗(LⅠBio，LS-C3811/29843)，兔超敏二步法免疫组化检测试剂(北京中杉金桥生物技术有限公司)，柠檬酸盐缓冲液(北京中杉金桥生物技术有限公司)，抗利尿激素ELⅠSA 试剂盒(Cayman，583951)。

    1.3 仪器

    Olympus bx51 显微镜;LEⅠCA EM TP 组织包埋机;LEⅠCA RM 2235 组织切片机;LEⅠCA HⅠ1220 烤片机;THERMO MK3 全自动酶标仪;Olympus Anymicro DSSTM 图像采集系统。

    1.4 分组与给药

    将大鼠随机分为正常组、模型组、蒙脱石散组、加减参苓白术散高剂量组、中剂量组、低剂量组，每组7 只，分别按照10 mL/kg 给予生理盐水、蒙脱石散溶液(0.9 g/kg)、加减参苓白术散(4.6g/kg)、加减参苓白术散(2.3 g/kg)、加减参苓白术散(1.2g/kg)，每天1 次，连续灌胃7 天。

    1.5 模型建立

    采用高乳糖饲料喂养叠加水环境小平台站立法[5-7]建立脾虚泄泻大鼠模型，连续高乳糖饲料喂养幼龄Wistar 大鼠14 天 ......