董笑克 魏竞竞 杨凯 吴迪 李彤 赵丕文 牛建昭

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 21日龄幼年Wistar清洁雌性大鼠60只，体质量(50±5)g，均在21日龄断乳[北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物生产许可证号:SCXK(京)2012-0001]。

    1.1.2 试验药物 助仙丹配方颗粒:茯苓15 g、陈皮 15 g、白术 9 g、白芍 9 g、山药 9 g、菟丝子 6 g、杜仲3 g、甘草3 g(购自北京中医药大学东方医院颗粒药房);炔雌醇环丙孕酮片(商品名:达英-35，拜耳先灵医药股份有限公司);注射用人绒毛膜促性腺激素(上海第一生化药业有限公司，生产批号:1303031);左炔孕酮硅胶棒(上海达华药业有限公司，规格:75 mg，生产批号:20121128);血清睾酮酶联免疫吸附法检测试剂盒(普博欣试剂公司)。

    1.1.3 试验仪器 电子读数分析天平(上海民桥精密科学仪器有限公司)，高速离心机(博励行仪器有限公司)，普通手术器械，显微镜(Olympus)，酶联免疫检测仪(Tecan)。

    1.2 方法

    1.2.1 动物模型的建立 60只大鼠于室温18～22℃环境下适应2天，并按实验动物使用的3R原则给予人道的关怀。将实验大鼠随机分为2组，空白对照组8只，造模组52只。空白对照组大鼠喂以普通饲料，正常饲养，于27日龄始每天颈背部皮下注射与实验组等量生理盐水，共9天。造模组52只大鼠按照朱亮等[2]的方法，适应性喂养3天后于24日龄开始，用1%戊巴比妥钠溶液麻醉后皮下埋植左旋18-甲基炔诺酮硅胶棒，3 mm/只，27日龄开始皮下注射人绒毛膜促性腺激素1.5 U，2次/天，共9天，35日龄连续阴道涂片2个动情周期[(4～5)天×2]。观察到阴道涂片染色(阴道涂片染色后观察显示无规律动情周期，见大量白细胞，偶见少量角化细胞，处于动情间期时相 ......