糖肾宁对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织血小板衍生生长因子及受体表达的影响
肾小管,周龄,缬沙坦,1材料与方法,1动物,2药物,3主要试剂,4主要仪器,5模型建立与分组,6标本采集及观察指标,7统计方法,2结果,1糖肾宁对体重的影响,2糖肾宁对血糖的影响
刘迎新 邹大威 耿建国 高彦彬 尚雅文 李娇阳 龚慕辛 彭麒朕糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最主要的微血管并发症,也是导致终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)的首要因素[1]。DN病理表现为肾小球硬化(肾小球基底膜增厚、肾小球肥大、系膜基质增多)和肾小管间质纤维化(成纤维细胞的增生及由此造成的细胞外基质过度堆积)[2-3]。近年研究发现,血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)与其相应受体(platelet-derived growth factor receptor,PDGFR)结合,通过多种信号通路发挥促进细胞增生、迁移和细胞外基质增生作用,在DN肾纤维化进程中起到了促进作用。本课题采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型,通过观察糖肾宁对肾组织PDGF、PDGFR蛋白表达的影响,探讨糖肾宁防治糖尿病肾病的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物
8周龄SPF级雄性KK-Ay小鼠60只,8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠20只,均购自北京华阜康生物科技股份有限公司,动物合格证号SCXK(京)2014-0004。KK-Ay小鼠高脂饲料(购自北京华阜康生物科技股份有限公司,合格证号SCXK(京)2009-0008)。
1.2 药物
糖肾宁(主药配比:黄芪4份、金樱子2份、川芎2份、大黄1份、葛根2份,由首都医科大学中医药学院中药制剂室制备成浸膏粉);缬沙坦胶囊(商品名:代文,规格:80 mg/粒,批号 X1448,北京诺华制药有限公司)。
1.3 主要试剂
Anti-PDGF antibody(Abcam,ab125268),PDGF Receptor beta(Epitomics,1469-1)。尿白蛋白酶联免疫测定试剂盒(ICL,批号:29S1),丽春红(国家集团化学试剂有限公司,CAS:123334-10-1),冰醋酸(国家集团化学试剂有限公司,CAS:3761-53-3),苯胺蓝(国家集团化学试剂有限公司,CAS:8004-91-9)。
1.4 主要仪器
电子天平(YP601N,上海精密科学仪器有限公司),血糖仪(One touch ultra,强生中国医疗器械有限公司) ......
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