李昕 李雁 刘丽杰 黄瑞音 王谦 孙庆巧 骆长永 万茂婷 梁旭 吴元德 王欣

    ·论著·

    益气化瘀解毒方对急性呼吸窘迫综合征大鼠NF-κB/p38MAPK通路的影响

    李昕 李雁 刘丽杰 黄瑞音 王谦 孙庆巧 骆长永 万茂婷 梁旭 吴元德 王欣

    目的 观察益气化瘀解毒方对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)所致大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)的保护作用并探讨其作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为空白组、模型组及益气化瘀解毒方低、中、高剂量组5组，每组6只。尾静脉注射LPS建立ARDS模型。治疗组益气化瘀解毒方灌胃，造模后16小时处死大鼠收集标本，测定大鼠肺系数、肺通透指数、核转录因子-κB p50、IκBα、p38的蛋白表达及光镜下观察肺组织病理学改变。结果 益气化瘀解毒方减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏、肺水肿及炎性细胞浸润，降低肺系数(P1 材料与方法

    1.1 实验动物

    清洁级SD雄性大鼠30只(北京维通利华实验动物技术有限公司)，许可证号SCXK(京)2012-0001，8周龄，体质量(200±10) g。实验期间饲养于北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室SPF级实验动物房。

    1.2 主要试剂、仪器

    内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS) Sigma，L2880)，Bradford蛋白浓度测定试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)，SDS、BCA蛋白质定量试剂盒(北京普利莱基因技术有限公司)，PVDF Western转印膜(Millipore)，兔抗大鼠NF-κB p50抗体、兔抗大鼠IκBα抗体、小鼠抗大鼠p38抗体(Abcam)，二抗(北京博奥森生物技术有限公司)，即用型免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒(兔或鼠)(福建迈新生物技术开发有限公司)。益气化瘀解毒方(黄芪30 g、三七10 g、赤芍15 g、炒枳实12 g、金银花15 g、黄芩10 g、桑白皮15 g、葶苈子15 g)中药颗粒由首创药业提供。BH2生物显微镜(OLYMPUS)，Varioskan Flash光谱扫描多功能读数仪(Thermo Scientific)。

    1.3 动物分组与给药

    30只清洁级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、中药低、中、高剂量组(简称低、中、高剂量组)，每组6只。适应性喂养1周后开始灌胃给药，中药低、中、高剂量组分别以6.1 g/(kg·d)、12.2 g/(kg·d)、24.4 g/(kg·d)(给药剂量为生药剂量)益气化瘀解毒方溶液灌胃 ......