谷雨龙 刘斌 姜艳艳

    ·论著·

    高效液相色谱法测定黄芪赤风汤提取物中萜类和色酮类成分的含量

    谷雨龙 刘斌 姜艳艳

    目的 建立HPLC法测定黄芪赤风汤提取物中萜类和色酮类成分的含量。方法 采用Venusil MP-C18(4.6×250 mm，5 μm)色谱柱；以乙腈(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱(0～45 min，10%→18% A；45～100 min，18%→45% A)；检测波长：220 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；LCMS-IT-TOF法指认萜类和色酮类成分，分别以芍药苷和毛蕊异黄酮苷为参比计算两类成分含量。结果 芍药苷和毛蕊异黄酮苷的线性范围分别为0.279～6.696 μg和0.192～4.608 μg(r=0.999 8)；平均回收率(n=6)分别为98.83%和98.21%，RSD分别为3.06%和3.24%；经LCMS-IT-TOF法指认萜类成分4个，色酮类成分12个。结论 所建立的方法快速、简单、准确、专属性强，精密度好，可用于黄芪赤风汤提取物的质量控制。

    高效液相色谱法； 黄芪赤风汤提取物； 芍药苷； 毛蕊异黄酮苷

    经典方剂黄芪赤风汤源自清代王清任的《医林改错》，由黄芪、赤芍和防风组成。其中，黄芪补气活血、宣通营卫，为君药；赤芍清热凉血、活血祛瘀，助黄芪使气足血行，周流全身，为臣药；佐以防风祛风解表、胜湿解痉止痛。“如治诸疮、诸病，或因病虚弱，服之皆效。无病服之，不生疾病。此方治诸病皆效者，能使周身之气通而不滞，血活而不瘀，气通血活，何患疾病不除。”现代研究表明，黄芪皂苷及黄酮部位可以抑制滑膜成纤维细胞的增殖，发挥保护关节损伤的作用，黄芪黄酮具有免疫调节作用[1-3]；赤芍单萜苷具有消炎镇痛、改善血液流变学和免疫调节的作用[4,5]；防风色原酮有显著的镇痛、抗炎和降低血浆黏度活性[6,7]，上述四类成分系该方的主要有效部位或组分。为此，采用大孔吸附树脂分离纯化技术，分离富集了黄芪皂苷与黄酮部位、赤芍单萜苷部位、防风色原酮部位，制得黄芪赤风汤提取物，先期采用不同方法对该方提取物中主要成分含量进行了测定[8-9]。为全面控制该方提取物质量，采用LCMS-IT-TOF对其化学成分进行分析(另文发表)，同时以芍药苷作为萜类(黄芪皂苷、赤芍单萜苷)的指标性成分，以毛蕊异黄酮苷作为色酮类(黄芪黄酮、防风色原酮)的指标性成分，建立HPLC方法同时测定两类成分的相对含量。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试药

    LCMS-IT-TOF仪(日本岛津公司) ......