康学 许保海

    ·论著·

    参芪降糖颗粒对高糖环境下施万细胞氧化应激的调节作用

    康学 许保海

    目的探讨参芪降糖颗粒对高糖环境下施万细胞氧化应激的调节作用。方法采用高糖环境下培养的施万细胞建立氧化应激模型，实验分为正常对照组、高糖组、参芪降糖含药血清组和甲钴胺含药血清组，干预48小时后，用酶标仪检测细胞中总抗氧化能力(total antioxidant capacity，T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和丙二醛(malondialdehyde， MDA)含量，应用流式细胞仪检测活性氧分子(reactive oxygen species，ROS)水平。结果高糖干预48小时后，与正常对照组比较，高糖组细胞T-AOC和SOD含量明显降低，ROS、MDA水平显著升高(P1 材料与方法

    1.1动物和细胞来源

    SPF级雄性SD大鼠35只，6～8周龄，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：SCXK(京)2012-0001。RSC96 cell line(ATCC?CRL-2765TM)，购自American Type Culture Collection。

    1.2试剂与药品

    D-(+)-Glucose(No.D7021，Sigma-Aldrich Inc.)；DMEM培养基(No.11965-092，Gibco)，0.25%胰蛋白酶消化液(不含EDTA和酚红，T1305，索莱宝科技有限公司)；MTT(No.M5655，Sigma)；DMSO(No.D2650，Sigma)。T-AOC试剂盒(No.20170320)、SOD试剂盒(No.20170314)、MDA试剂盒(No.20170314)和总蛋白测定试剂盒(No.20170308)，均购自南京建成生物工程研究所。ROS试剂盒(No.88-5930，eBioscience)。参芪降糖颗粒(批号：41913327，鲁南厚普制药有限公司)；甲钴胺片(商品名：弥可保，0.5 mg/片，批号：1609066，卫材药业有限公司)。

    1.3仪器

    371型CO2培养箱(Thermo)；SpectraMax Plus 384全波长酶标仪(Molecular Devices)LSRFortessa流式细胞分析仪(BD Bioscience)；LWD300-38LTI三目倒置相差显微镜(上海测维光电)；Biofuge 15R低温生物离心机(Heraeus SEPATECH)；UW3100型超声破碎仪(BANDELIN)；XDTD-8222恒温鼓风干燥箱(精宏实验设备有限公司)；W-01B数显恒温水浴锅(金怡仪器科技有限公司) ......