孟雪丹 赵崇军 赵霞 张文婷 王昭懿 顾念念 冯丹 吴怡青 邹迪新 林瑞超

    不育不孕在全球的患病率约为9%[1-2]，少精症是男性不育的主要临床表型，发病机制复杂(基因突变、环境污染、性激素内分泌紊乱等)，现代医学尚无有效的药物治疗方案[3]。

    五子衍宗丸是中医治疗少弱精症的经典名方，由五味子、枸杞子、覆盆子、菟丝子、车前子组成，临床上对于少精子症治疗效果显著[4]。大量临床观察和实验研究不断拓展了对五子衍宗丸药理性质的认识，但多数评价仍停留在某个或某几个角度或水平进行研究，缺乏五子衍宗丸作用机制的系统研究，限制了该方的进一步开发和临床应用[5]。白消安可造成睾丸生精细胞的损伤，是诱导少精症动物模型的常见方法[6]。为了从整体上探讨五子衍宗丸治疗少精症的分子机制，本研究应用基因芯片技术，分析经五子衍宗丸治疗后的少精症小鼠睾丸组织基因表达谱的变化，应用生物信息学从药物调控基因的功能、信号通路等方面，为全面系统地探讨五子衍宗丸治疗少精症的分子机制提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组

    Balb/c雄性小鼠，(20±2)g，10周龄，SPF级，购于北京维通利华实验动物技术有限公司(中国，北京)[许可证号：SCXK(京) 2018-0010]。动物饲养于屏障系统中，温度为 ( 25±1) °C，相对湿度为50%～60%，自由饮水及进食。动物实验与操作遵照北京中医药大学伦理委员会的要求进行。将36只Balb/c小鼠随机分成少精症组、五子衍宗丸治疗组和正常对照组，共3组，每组各12只。少精症组给药方法：小鼠腹腔注射白消安的DMSO溶液(1 mg/mL)，给药剂量为20 mg/kg，建造白消安致小鼠少精症模型。小鼠自白消安腹腔注射第2天，口服灌胃生理盐水(14 mL/kg/d)，每日1次，连续14天。五子衍宗丸治疗组给药方法：小鼠自白消安腹腔注射第2天，口服灌胃给予五子衍宗丸 (1.56 g/kg/d)，每日1次，连续14天。正常对照组给药方法：小鼠腹腔注射DMSO(1 mL/kg)，作为正常对照组。小鼠自DMSO腔注射第2天，口服灌胃给予生理盐水溶液(14 mL/kg/d)，每日1次，连续14天。

    1.2 药物与试剂

    五子衍宗丸：枸杞子、五味子、覆盆子、菟丝子、车前子购于同仁堂药业有限公司(中国北京)，制备标准参照2015版《中华人民共国药典》，由北京中医药大学中药品质评价中心(北京市重点实验室)制备成大蜜丸，4°C保存备用。白消安购于麦克林生物化学公司 (中国上海) ......