王飞 陆瑞敏 王淑艳 王梦薇 张迪 王启航 李丽娜 陈萌

    Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal，ICC)介于肠神经系统和平滑肌细胞之间的“起搏细胞”，参与胃肠动力的调节[1]。实验表明，许多胃肠动力障碍性疾病都伴随着ICC数量减少或网络结构的破坏[2]，同时ICC数量减少或结构异常也会引发胃肠功能障碍疾病[3]。目前，关于胃肠动力障碍疾病，治疗手段单一，“心下痞”与现代医学胃肠功能障碍之病状十分相似[4]，而半夏泻心汤为医治“心下痞”的经方，临床效果显著。已有研究表明，ICC受炎症、氧化应激、梗阻等影响，可导致“典型”的表型丧失，但其表型具有可塑性[5]。因此，本研究从细胞分子角度入手，观察半夏泻心汤对ICC表型维持蛋白及其相关钙离子通道蛋白的影响，探索半夏泻心汤治疗胃肠动力障碍性疾病的可能作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与动物

    新生小鼠原代胃cajal间质细胞(拓普生物，批号：TOPCP1024)；清洁级雄性SD大鼠30只，体重(200±20)g，购于斯贝福生物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2016-0002。常规饲养于北京中医药大学中医学院清洁级动物房。

    1.2 药物与试剂

    半夏泻心汤中药免煎颗粒购于北京康仁堂药业有限公司；兔抗c-Kit多克隆抗体(批号：D13A2)、山羊抗兔488标记荧光二抗(批号：A23220)购自美国Cell Signaling公司；c-Kit Antibody(批号：SC-365504)购自美国Santa公司；Desmin antibody(批号：16520-1-AP)购自中国proteintech公司；SMMHC antibody(批号：ab125884)、α-SMA antibody(批号：ab5694)购自美国Abcam公司；Dylighe 549, Goat Anti-Rabbit IgG(批号：A23320)、Dylighe 649,Goat Anti-Mouse IgG(批号：A23610)购自美国Abbkine公司；Total RNA Extraction Kit(批号：GPQ1801)、mRNA cDNA Synthesis Kit(批号：GPQ1803)、mRNA/lncRNA qPCR Kit(批号：GPQ1808)、Protein Extraction Kit(批号：GPP1815)、SDS-PAGE Gel Kit(批号：GPP1816)、ECL Plus Western Blot Kit(批号：GPP1824)均购自北京GenePool公司 ......