贾哲 董海鹏 韩婷 徐文娟 李春帅 刘梦楠 林青华 赵崇军 徐新房 李向日

    槟榔是棕榈科植物槟榔ArecacatechuL.的干燥成熟种子，始载于晋代李当之《药录》，在中国有一千多年的药用历史。功效为杀虫，消积，行气，利水，截疟[1]。槟榔幼果为食用槟榔，皮壳一起嚼食，食用后让人有醉酒的感觉，使两颊发红、心跳加快。机体出现以上反应与槟榔中的生物碱类成分有关。两种槟榔各自所含的多种生物碱中，含量最高且起关键作用的都是槟榔碱(arecoline)[2-4]，且前期研究发现食用槟榔中的槟榔碱含量明显低于药用槟榔[5]，血清代谢组学发现药用槟榔水煎液具有一定的心脏毒性[6-7]。槟榔碱可兴奋M-胆碱受体，引起腺体分泌增加，也可兴奋N-胆碱受体，表现为兴奋骨骼肌、神经节及颈动脉等，还具有增加肠蠕动，抑菌、驱虫作用[8]。针对槟榔碱的毒性报道多集中在致口腔粘膜下纤维性变[9-13]、生殖系统[14-15]、神经系统[16]、肝脏[17]和遗传毒性[18]等方面，目前未见对其胚胎发育及心脏毒性的报道。槟榔碱性质不稳定，氢溴酸槟榔碱是其稳定存在形式。

    斑马鱼与人类具有87%的基因同源性，可被广泛应用于模型构建、药物毒理学评价等[19]研究。其身体透明，具有可识别的肝脏、心脏等器官，常以有机整体参与实验，可以直观地从整体水平评价药物的毒理作用[20]。发育中的幼鱼组织快速的细胞分裂和分化，特别容易受到外界有毒物质的侵害[21]。

    因此本文以氢溴酸槟榔碱为研究对象，探讨氢溴酸槟榔碱对斑马鱼的胚胎发育毒性和心脏毒性。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    AB系野生型斑马鱼购置于中国科学院水生生物研究所，养殖于集中式斑马鱼养殖系统(水温28.5℃、光照周期为14小时光照/10小时黑暗)，每日喂食3次活体丰年虾。暗周期开始前选择健康的成年斑马鱼按雌雄比1∶2放入产卵缸内，中间放置隔板，于第二天光周期开始后抽去隔板，半小时后收集鱼卵于干净的培养皿中，胚胎培养液冲洗3遍，在显微镜下挑选受精后6小时且发育正常的胚胎，一部分作为胚胎发育毒性的研究对象；一部分重新放入新的含胚胎培养液的培养皿中，28.5℃恒温培养箱中培养，相同光照条件下发育至受精后4天，于受精后3天在体式显微镜下挑选出健康的斑马鱼幼鱼，作为心脏毒性的研究对象。

    1.2 试剂与仪器

    氢溴酸槟榔碱标准品(上海诗丹德生物技术有限公司，批号：1344/18868，含量> 99.0%)。NaCl，KCl，Na2HPO4 ......