从线粒体凋亡通路探讨参附注射液对脓毒症小鼠心肌损害的影响
造模,心肌细胞,1材料与方法,1动物,2分组与造模,3电镜观察小鼠心肌超微结构,4苏木精—伊红染色,5TUNEL法检测心肌细胞凋亡,6蛋白质免疫印迹法,7统计学处理,2结果,1各组小鼠脓毒症心肌损伤模型
徐坡 谢靖 彭媛 陆士奇脓毒症是严重创伤、重症感染等多种危重疾病应激状态下的常见并发症,具有高发病率,高死亡率的特点,其高死亡率与它易致多脏器功能损伤直接相关。40%~50%的脓毒症可导致心功能不全[1],心肌细胞损伤是脓毒症心功能不全发生的主要原因,细胞凋亡在脓毒症的发生、发展中起重要作用,早在2008年Flierl MR等[2]的研究就证明抗凋亡治疗有逆转脓毒症心肌损伤的作用。本研究通过观察参附注射液对脓毒症小鼠心肌细胞凋亡指数、心肌线粒体超微结构及心肌组织B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymPhoma-2,Bcl-2)、BH3介导的死亡域激动剂(BH3 interacting-domain death agonist,Bid)、截短型Bid(truncated Bid,tBid)、半胱胺酸-天门冬胺酸酶(cysteine-dePendent asPartate-sPecifc Proteases-9,Caspase-9)蛋白表达的影响,从线粒体凋亡通路探讨参附注射液对脓毒症小鼠心肌线粒体损伤的保护作用及其机制。
1 材料与方法
1.1 动物
选取56只5~6周龄SPF级雄性C57/B6J小鼠[由常州卡文斯实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK(苏)2016-0010。动物合格证编号:201915419],动物饲养在苏州大学附属第一医院实验动物中心,温度22~24℃、相对湿度为40%~70%的SPF环境中,自由进食和饮水,适应性喂养1周后进行实验。
1.2 分组与造模
56只雄性C57/B6J小鼠被随机分为4组,具体分组如下:正常对照组9只(NC组,不做任何处理);假脓毒症组9只(Sham组,腹腔注射溶媒);脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)腹腔注射诱导脓毒症模型组12只(LPS组);LPS造模+参附注射液腹腔注射组(SFI组)26只。造模予LPS(sigma L2880)按8 mg/kg单次腹腔注射LPS溶液;SFI组在造模前24小时、12小时、6小时分别腹腔注射参附注射液(雅安三九药业有限公司,剂量按10.0 mL/kg进行)。除NC组外,另外3组别动物 ......
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