张琦 靳雯棋 张乃文 安珊 徐慧琛 朴春丽

    目前，中国糖尿病的发病率飞速增长，根据最新全国流行病学调查报告，其形势不容乐观，成年人患病人数约为1.298亿[1]。因此防治糖尿病刻不容缓。糖尿病及其并发症的发生皆与β细胞数量减少及功能损伤直接相关[2]，长时间暴露在高糖之下会诱发β细胞凋亡[3]。目前越来越多的研究表明，内质网应激与胰岛β细胞的功能和数量密切相关[4]。胰岛β细胞具有高度发达的内质网，而内质网膜上有3种跨膜蛋白，即：阻抗性激酶lα(inositol-requiring enzyme 1α，IRE1α)、双链RNA依赖性蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase R -like endoplasmic reticulum kinase，PERK)和活化的转录因子6(activating transcription factor 6，ATF6)[5]，这3种跨膜蛋白是能引起未折叠蛋白反应的效应蛋白[6]。当机体处于高糖环境时，内质网未折叠或错误折叠蛋白增多，导致其功能紊乱，即而发生未折叠蛋白反应。当未折叠蛋白质在内质网中积累时，IRE1α、ATF6、PERK 3条信号通路就会被激活，从而介导胰岛细胞的损伤[7]。因此，在治疗2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)时，从调控内质网应激方面入手将会成为一个新的治疗方向。

    糖尿病属于中医“消渴”范畴，其发生发展与肝脏关系密切，“从肝论治”已成为中医治疗糖尿病的重要理论依据之一[8]。解毒通络调肝方是基于“毒损肝络”理论确立治疗T2DM的有效方剂，在前期的大量临床试验中验证[9-10]，解毒通络调肝方对T2DM及其并发症的患者治疗效果明显，具有促进糖脂代谢、缓解临床症状的作用。前期基础实验研究证明解毒通络调肝方可改善糖脂代谢及胰岛素抵抗，抑制其胰腺组织细胞凋亡[11-12]。本研究采用体外培养的大鼠胰岛β细胞株[大鼠胰岛细胞瘤细胞(islet cell tumor cell,INS-1)]，观察解毒通络调肝方对高糖诱导的INS-1细胞损伤和对胰岛β细胞保护的影响，并从内质网应激角度探究其可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与药物

    INS-1细胞购于中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。将细胞株培养于含10%的1640 培养基中，在37℃，95%湿度，5%CO2培养箱中培养。采用对数生长期细胞进行后续实验。

    解毒通络调肝方，药物组成：黄连 15 g、榛花10 g、酒大黄 6 g、黄芪15 g、丹参15 g、柴胡10 g ......