苏通 代培 丁雷 刘铜华 胡浩 胡燕 秦灵灵 周静鑫 王志程 郭翔宇

    糖尿病现已成为继肿瘤、心脑血管病之后第三大严重威胁人类健康的慢性非传染性疾病[1]，国际糖尿病联盟(International Diabetes Federation, IDF)2019年发布的第九版糖尿病地图统计显示，目前全球约有4.63亿糖尿病患者，其中中国的成人糖尿病患者达到了1.164亿[2]。已有研究证实，microRNA与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)的发生发展密切相关。microRNA是一类长约20～24 nt的非编码RNA，虽然不能直接编码蛋白，但可部分结合于靶基因mRNA的3’非翻译区从而抑制基因转录后的表达[3]，因此，研究中药对microRNA的调控机制是中药现代化研究的重点方向。中国民间常用的降糖中药番石榴叶(Folium Psidii Guajavae Psidium guajava L.)是桃金娘科植物番石榴的干燥枝叶，其单味药制剂“消渴降糖胶囊”被收录于《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》第十五册，可治疗轻、中度糖尿病[4]。本实验通过基因芯片技术对番石榴叶提取物干预后的Zucker糖尿病肥胖(Zucker diabetic fatty,ZDF)大鼠胰腺组织进行检测分析，从分子水平上揭示番石榴叶对T2DM大鼠胰腺microRNA表达调控的影响，为发掘番石榴叶治疗T2DM的新靶点提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级雄性自发T2DM模型ZDF大鼠12只、同周龄正常雄性Zucker瘦型(Zucker lean, ZL)大鼠6只，均购自北京维通利华实验技术有限公司，6周龄，体质量180～200 g，饲养于北京中医药大学SPF级动物实验室[动物许可证号：SYXK(京)2016-0038]。除每周检测空腹血糖前禁食12小时外，大鼠均自由进食、饮水及活动，12小时/12小时自然昼夜光线交替照射。

    1.2 药物与试剂

    番石榴叶药材原料购自四川医药集团(中国成都)，其乙醇提取物由北京中医药大学中药学院制备，提取过程如下：干药材分别加入12 BV和10 BV水提取两次，第一次提取1小时，第二次提取45分钟，合并滤液，减压浓缩至约1 g/mL的浓度，过滤 ......