何宇 王建勋 王佩佩 崔鑫铭 王利

    据2020年全球癌症报告数据显示，2020年非霍奇金淋巴瘤全球男性估计新发病例占比为3%，女性为2.6%，男性多于女性[1]。Burkitt’s 淋巴瘤属于非霍奇金淋巴瘤的一种，是一种侵袭性极强的 B 细胞淋巴瘤，多发生于儿童和成年人[2-3]，临床上主要分为地域型、散发型和免疫缺陷相关型三种[4]，Burkitt's 淋巴瘤对化疗药物高度敏感，目前临床治疗仍以多药化疗为主，同时包括靶向治疗、细胞免疫治疗、局部放疗、自体干细胞移植等[5-6]。

    中医古籍中并没有淋巴瘤一称，随着时代的发展，医疗的进步，被现代中医学家归为“恶核”“痰核”“阴疽”等范畴，主要表现在“痰、毒、瘀、滞、虚”五个方面[7]，病因病机与邪毒、痰凝等有关，治疗应以解毒散瘀为原则[8-9]。蟾蜍，早在《神农本草经》[10]中便有记载：“蟆，味辛、寒，主邪气，破坚血，痈肿，阴疮，服之不患热病。”《本草纲目》记载：“蟾蜍，辛、凉、微毒，最良治一切五疳八痢，肿毒，破伤风病，脱肛。”华蟾素注射液便是从蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍等蟾蜍干皮经水提醇沉方法得到的水溶性提取物[11]，再加工成注射用灭菌水溶液，具有清热解毒、化瘀溃坚、利水消肿等作用。被广泛用于肝癌、肺癌、胃癌等多种中晚期恶性肿瘤的治疗，但华蟾素注射液对于Burkitt’s淋巴瘤治疗方面少有研究。Raji细胞株于1963年首次从一个11岁小男孩左上颌骨Burkitt’s淋巴瘤中分离而得到的，为B细胞起源，是Burkitt’s淋巴瘤药理学研究的理想选择。基于实验室前期研究方案与方法[12]，因此本实验拟通过观察和检测不同浓度华蟾素注射液对Burkitt’s淋巴瘤细胞Raji的生物学影响，探讨华蟾素注射液在治疗Burkitt’s淋巴瘤方面的作用效果及相关机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂与仪器

    人Burkitt's 淋巴瘤Raji细胞株(美国ATCC细胞库，编号：CCL-86)；华蟾素注射液(安徽金蟾生化股份有限公司，批号：211201)；RPMI-1640培养基(美国CORNING公司，批号：34320006)；胎牛血清(美国Gibco公司，批号：2084568P)；1×PBS(美国Gibco公司，批号：8119312)；细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8，CCK-8)(江苏凯基生物技术股份有限公司，批号：20211210)；膜联蛋白—异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin-FITC/PI)细胞凋亡检测试剂盒(北京金普来生物科技有限公司 ......