扈觐玺 刘佳琪 邵紫萱 李丽 冯颖童 刘双巧 贾岚 王景霞

    当代社会竞争日趋激烈,工作生活压力增大,精神紧张,作息不规律等诸多因素,导致部分人群处于免疫力低下的亚健康状态[1],而增强免疫力类保健食品是一种安全增强免疫力,改善亚健康状态的有效措施。黄芪石斛方是在中医辨证保健理论[2]指导下,基于未病先防的思想,针对免疫功能低下人群属脾肾亏虚者而设,选择具有健脾补肾,益气养阴功效的黄芪、女贞子、西洋参、铁皮石斛配伍而成。本研究按照《保健食品检验与评价技术规范》[3]评价黄芪石斛方增强免疫力的保健功能,探讨“健脾补肾,益气养阴法”与增强免疫力的关系,为黄芪石斛方精准应用于免疫力低下人群,降低患病风险提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    80只SPF级雄性昆明小鼠,体质量18～22 g,购自北京斯贝福生物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2019-0010。动物饲养于北京中医药大学动物实验室的屏障环境中,室温为(24±2)℃,空气相对湿度为(60±10)%,光照12小时/天,自由饮水。动物伦理审批号:BUCM-4-2019110201-4032。

    1.2 实验药物

    黄芪(批号:200602CP273)购自河北万修药业有限公司;女贞子(批号:201201)、西洋参(批号:201101)购自珠海市健兴药业有限公司;铁皮石斛(批号:20201201)购自云南天泉生物科技股份有限公司。制备:由北京中医药大学中医临床药学实验室制备,按3∶3∶2∶3比例称取黄芪、女贞子、西洋参、铁皮石斛,经水提、浓缩、干燥、粉碎等工艺制得干膏粉,作为受试物。

    1.3 主要试剂

    刀豆蛋白A(Sigma,批号:L6397)、MTT(阿拉丁,批号:D274386)、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(阿拉丁,批号:D103272)、乳酸脱氢酶(Sigma,批号:L1254)、PMS(Sigma,批号:P9625)、氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(Sigma,批号:P9625)、Tris(阿拉丁,批号:T105289)、NH4Cl(阿拉丁,批号:A116370)、血清溶血素水平(serum hemolysin level,HC50)试剂盒(华英生物,批号:20220725)、免疫球蛋白A(华英生物,批号:20220915)、免疫球蛋白G(华英生物,批号:20220915)、免疫球蛋白M(华英生物,批号:20220915)、补体C3(华英生物,批号:20220915)、补体C4(华英生物,批号:20220915)、肿瘤坏死因子α(华英生物,批号:20220910)、γ干扰素(华英生物,批号:20220910)、白细胞介素2(interleukin 2,IL-2)(华英生物,批号:20220910)、绵羊红细胞(华英生物,批号:20220915)、正常豚鼠血清(华英生物,批号:20220915)、都氏试剂(海标科技,批号:20220805H) ......