化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠模型抗炎机制探究
甲氨蝶呤,皮损,1材料与方法,1实验动物,2实验药物,3主要实验试剂与仪器,4实验方法,5观察指标,6统计学方法,2结果,1皮损变化及评分比较,2皮肤组织学变化,3皮肤组织中TNF-α,IFN-γ,IL
于心荟 李元文 任雪雯 邓宇童 王莹 王化龙 刘晓东 冯蕙裳银屑病是一种常见的慢性炎症性复发性皮肤疾病,临床表现主要是鳞屑性红斑或斑块,世界范围内发病率约1%~3%[1]。免疫异常被视为银屑病发病的重要环节,免疫细胞激活后产生多种炎症细胞因子,促进细胞增殖角化及炎症细胞浸润,导致银屑病的发生发展。化斑解毒方是李元文教授通过前期数据挖掘结合多年的临床经验与理论探索总结出的中药方剂[2],临床应用于寻常型银屑病血热证患者具有确切疗效,能够有效减轻患者皮肤炎症反应,但其治疗银屑病的作用机制尚不明确。本研究拟通过测定不同浓度的化斑解毒方对咪喹莫特诱导银屑病样皮炎小鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达水平的影响,探究其治疗银屑病的抗炎作用,并为化斑解毒方的临床应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物
SPF级雄性BALB/c小鼠60只,8周龄,体质量约20 g,购于斯贝福(北京)生物技术有限公司,动物质量合格证号:110324221101061643;实验动物生产许可证号:SCKX(京)2019-0010。小鼠于北京中医药大学动物房适应性喂养1周后开始实验。
1.2 实验药物
化斑解毒方组成:白花蛇舌草30 g、半枝莲15 g、威灵仙10 g、苍术10 g、土茯苓15 g、生槐花10 g、玄参20 g、生地10 g、香附10 g、牛蒡子10 g、知母10 g、金银花15 g、猪苓10 g、白术10 g、炙甘草6 g。所用药物为颗粒剂,由江阴天江药业有限公司配制,产品批号2202306。
甲氨蝶呤片(通化茂祥制药有限公司,产品批号:197220504,规格:2.5 mg);咪喹莫特乳膏(四川明欣药业有限责任公司,产品批号40220501,规格:250 mg∶12.5 mg)。
1.3 主要实验试剂与仪器
凡士林(德新康,批号:Q/371426DXK027);4%多聚甲醛(Solarbio,批号:P1110);苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色试剂盒(北京中科万邦生物科技有限公司,批号:RY-0002);中性树胶封片剂(北京中科万邦生物科技有限公司,批号:FP-0001);TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-23酶联免疫吸附试验试剂盒(北京百奥思科生物医学技术有限公司,批号分别为:MD7125、MD16214、MD124889、MD53662);NF-κBp65抗体(Abcam,批号:AB32536);辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(Affinity,批号:T0021) ......
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