谢占维 孙玲玲 石瑞 孙亚萍 崔怡娴 田军彪

    卒中是全球第二大死亡原因,也是导致疾病负担增加的第三大原因[1],其中缺血性卒中(cerebral ischemic stroke,CIS)占比约为62.4%,属中医学“中风病”范畴。静脉溶栓是急性缺血性卒中治疗的基石,尽管血管内治疗已经得到长足发展,但诸多患者仍因时间窗和禁忌症无法从中获益[2]。即使闭塞血管再通,缺血区恢复血流灌注,仍有神经功能受损风险,这与发生了脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemic reperfusion injury,CIRI)有关[3]。有效保护神经血管单元(neurovascular unit,NVU)是改善中风患者神经功能最主要的策略。NVU主要由神经元、神经胶质细胞(少突胶质细胞、小胶质细胞和星形胶质细胞)、血管细胞(内皮细胞、周细胞和平滑肌细胞)和基底层组成,在卒中发生后的信号转导过程中发挥重要作用[4]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth inhibitor,VEGF)和Notch信号通路参与了神经、血管再生过程, 对于卒中后NVU的修复有调节作用[5-6]。益气活血化浊解毒方是依据“气虚血瘀,浊瘀毒损”的病机制定的中药复方。课题组前期化浊解毒活血通络方的研究表明[7-8],该方可以抑制Toll样受体4/核因子-κB(Toll-like receptor 4/nuclear factor-kappa B,TLR4/NF-κB)通路过度激活,降低促炎因子白细胞介素-1β(interleukin 1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)表达,调控Beclin1等自噬相关蛋白表达,发挥神经保护作用。本课题拟建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,探讨益气活血化浊解毒方对脑组织VEGF、Notch1、Dll4表达的影响,初步探究益气活血化浊解毒方对NVU的保护作用及相关机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    96只SPF级健康雄性SD大鼠,6～8周周龄,体质量(240±20)g,购于北京维通利华实验动物技术有限公司,动物许可证号:SCXK-(京)2021-0011。所有实验动物分笼饲养于河北中医学院实验动物中心屏蔽环境内,实验动物使用许可证号:SYXK(冀)2017-005,室温21～25℃,湿度50%～70%,均自由进食及饮水,实验动物于造模前适应性喂养7天,术前12小时禁食不禁水。本实验通过河北中医学院伦理委员会批准,伦理编号为:DWLL202205006 ......